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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
Saturating Dye for LAMP
- 保质期:
一年
- 供应商:
江苏天净沙
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
每套
| 常用的 SYBR Green I 核酸染料属于非饱和型荧光染料, 它在高浓度下会抑制 荧光 LAMP, 所以 LAMP 时只能使用较低的浓度。 而在较低浓度时, 染料分子跟 DNA 的合成线性关系不强(见下右图), 故反应重复性不稳定。 而饱和型荧光染料, 在饱和浓度下也不抑制荧光 LAMP 反应, 所以 LAMP 时可以使用饱和浓度。 在使 用饱和浓度时, 染料分子跟 DNA 的合成线性关系很强(见下左图), 故反应重复性 很好。 本产品就是一款专门用于 LAMP 的饱和型荧光染料, 它具有下列特点: 1. 饱和型染料, 可在饱和浓度使用, 不光试验重复性更好, 而且信噪比更高。 2. 抗水解、 抗热解和抗光解的能力强于 SYBR Green I。 3. 跟目前常用的 LAMP 扩增检测仪器兼容, 不需要改变仪器的任何设置, 直接在 SYBR Green I 通道采集信号即可。 4. 不能渗透进入细胞内, 毒性和致突变性远低于 SYBR Green I。 5. 可以用于染料法 LAMP、 染料法 RT-LAMP 等研究。 6. 本产品足够 1000 次 20uL 体系的 LAMP 或 RT-LAMP 扩增反应。 7. 本产品只能用于科研。 |
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文献和实验的Fl区段为起点,以自身为模板,进行DNA合成延伸。与此同时,FIP引物F2与环上单链F2c杂交,启动新一轮链置换反应。解离由F1区段合成的双链核酸。同样,在解离出的单链核酸上也会形成环状结构。在环状结构上存在单链形式B2c,BIP引物上的B2与其杂交,启动新一轮扩增。经过相同的过程,又形成环状结构。通过此过程,结果在同一条链上互补序列周而复始形成大小不一的结构。 3.LAMP扩增产物的检测;(1)荧光定量检测:利用SYBR Green工荧光染料只与双链DNA小沟结合,当它与DNA双链结合时
体的扫描。经过比较发现,空气加热型仪器以及样品温度单独控制的仪器有着更低的Tm标准偏差(0.018-0.065),而加热块型仪器则在0.092-0.274。在拥有饱和染料和高分辨率仪器之后,HRM分析就可以开始啦。这个过程其实很简单,就是对PCR的扩增子进行加热,温度从50°C逐渐上升到95°C。在此过程中,扩增子逐渐解链,在到达熔解温度(Tm)时,DNA链完全分开。在HRM分析的初期,荧光强度很高,随着温度升高,双链DNA逐渐减少,荧光强度也就下降了。HRM仪器通过照相机,记录下荧光变化的整个过程
液中再加入硫酸铵,使达到30%饱和度,离心20分钟,沉淀即为酶的粗制品。用少量0.02mol/L磷酸钾缓冲液(pH8.0)溶解,使其体积为开始时提取液体积的1/10,保存于冰箱中,待测。 2.酶活性测定 取一试管加入0.6─0.8ml 0.01mol/L KCN、0.5ml 0.04mol/L乙醇酸钾、0.5ml稀释5─10倍的酶液,加0.1mol/L磷酸钾缓冲液使体积达3.7ml,最后加入0.3ml二氯靛酚染料,使其总体积为4ml,迅速混匀倒入光径为1cm的比色









