- ￥2750
- YLKBIO
- YLK-PCR0287
- 国产
- 2025年10月30日
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
100
- 英文名：
/
- 保质期：
1年
- 供应商：
优利科（上海）生命科学有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
牛源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
产品说明
产品说明
物种鉴定系列可针对食品、饲料等样品中动物源性成分的特异核酸片段进行扩增，通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于牛源性成分的检测，检出限为 0.5%。
产品组成（48 测试）
产品组成（48 测试）
| 试剂 | 含量 |
| A-牛源-P | 20μL × 8 管× 6 排 |
| NG-P | 100μL × 2 支 |
| PG-牛源-P | 100μL × 1 支 |
适用仪器
ABI 7500、CFX 96、Mix 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。
自备耗材和仪器
①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。
ABI 7500、CFX 96、Mix 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。
自备耗材和仪器
①冰盒；②移液器（0.5-10μL，10-100μL，100-1000μL）及配套灭菌吸头；③离心机；④涡旋混匀器；⑤金属浴。
注意事项
-
- 本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
- 第一区：样本制备区。
- 第二区：模板添加区。
- 第三区：扩增及产物分析区。
- 本试剂检测灵敏度高。为了防止污染，实验要分区操作。
-
- 实验过程中穿戴工作服和乳胶手套，不同区域独立使用工具，需更换手套和实验服。
- 严格按照操作步骤操作，试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
- 反应液中的成分对光敏感，应避光保存。试剂使用前要完全解冻，但应避免反复冻融，推荐使用前离心 30秒。
-
- 反应结束后，扩增管请置于密封袋内丢弃，当日清理，开盖易造成气溶胶污染，禁止开盖。
- 不同批号试剂请勿混合使用，在有效期内使用。
样品处理
参照《肉制品中动物源性成分的测定 实时荧光 PCR 法》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。
样品的采集和制备是动物源性鉴别的重要步骤，为防止交叉污染，应使用一次性消耗品，研钵应经 160℃干烤2 h，其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次氯 钠溶液浸泡。
取样应尽量采取肌肉组织，对于同一批样品，应多点采集合并后，作为一份样品进行均质，提取 DNA。
采样过程应快速完成，将采取的样品迅速放入组织搅碎机中进行均质成糜状，充分混匀，取 0.1 g 充分混匀的样品，采用液氮研磨或均质器均质。
详细步骤请按照标准操作。
参照《肉制品中动物源性成分的测定 实时荧光 PCR 法》或其他标准处理样品，制备的样本保存待用。
样品的采集和制备是动物源性鉴别的重要步骤，为防止交叉污染，应使用一次性消耗品，研钵应经 160℃干烤2 h，其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次氯 钠溶液浸泡。
取样应尽量采取肌肉组织，对于同一批样品，应多点采集合并后，作为一份样品进行均质，提取 DNA。
采样过程应快速完成，将采取的样品迅速放入组织搅碎机中进行均质成糜状，充分混匀，取 0.1 g 充分混匀的样品，采用液氮研磨或均质器均质。
详细步骤请按照标准操作。
实验操作
结果判定 检测样品 Ct＞35，曲线为直线或轻微斜线，无“S”型扩增曲线，可报告样品阴性，不含有牛源性成分或含量低于检测限；
检测样品 Ct＜30，曲线呈“S”型扩增曲线，可直接报告样品阳性，含有牛源性成分；
检测样品 30≤Ct≤35，需进行一次重复实验，若 Ct 值>35 则为阴性，或无典型曲线，不含有牛源性成分或含量低于检测限；否则为阳性，含有牛源性成分。
★ NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。
- 模板制备（样本制备区）
- 添加模板（模板添加区，放置于冰盒上进行）
- 扩增反应（扩增及产物分析区）
| PCR 循环 | 荧光收集位点 | |||
| 去污染 | 37℃ | 10 分钟 | 1 个循环 | — |
| 预变性 | 95℃ | 5 分钟 | 1 个循环 | — |
扩增 |
95℃ | 15 秒 | 40 个循环 | — |
| 60℃ | 60 秒 | ※ | ||
- 基线和阈值设定
结果判定
检测样品 Ct＜30，曲线呈“S”型扩增曲线，可直接报告样品阳性，含有牛源性成分；
检测样品 30≤Ct≤35，需进行一次重复实验，若 Ct 值>35 则为阴性，或无典型曲线，不含有牛源性成分或含量低于检测限；否则为阳性，含有牛源性成分。
★ NG 反应为平滑直线，PG 反应为“S”型扩增曲线，此次检测结果有效，否则无效。如重复检测结果仍为无效，请与技术支持人员联系。
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技术资料牛源性成分核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
￥2750
