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牛源性成分核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

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  • ¥2750
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  • 国产
  • 2025年12月19日
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    • 库存

      100

    • 英文名

      /

    • 保质期

      1年

    • 供应商

      优利科(上海)生命科学有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      50T

    牛源性成分核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

    产品说明
    物种鉴定系列可针对食品、饲料等样品中动物源性成分的特异核酸片段进行扩增,通过实时扩增曲线判定结果。本产品用于牛源性成分的检测,检出限为 0.5%。

    产品组成(48 测试)
    试剂 含量
    A-牛源-P 20μL × 8 管× 6 排
     
    NG-P 100μL × 2 支
    PG-牛源-P 100μL × 1 支
     
     
    适用仪器
    ABI 7500、CFX 96、Mix 3005P、LineGene9600 等实时荧光 PCR 仪。

    自备耗材和仪器
    ①冰盒;②移液器(0.5-10μL,10-100μL,100-1000μL)及配套灭菌吸头;③离心机;④涡旋混匀器;⑤金属浴。


    产品细节图片1

     
    注意事项
      1. 本试剂检测灵敏度高。为了防止污染,实验要分区操作。
        1. 第一区:样本制备区。
        2. 第二区:模板添加区。
        3. 第三区:扩增及产物分析区。
    ★ 分区之间最好进行物理性隔离,避免人为因素造成的污染。
      1. 实验过程中穿戴工作服和乳胶手套,不同区域独立使用工具,需更换手套和实验服。
      2. 严格按照操作步骤操作,试剂配制和加样等步骤请严格按照说明书要求在冰盒上操作。
      3. 反应液中的成分对光敏感,应避光保存。试剂使用前要完全解冻,但应避免反复冻融,推荐使用前离心 30秒。
      1. 反应结束后,扩增管请置于密封袋内丢弃,当日清理,开盖易造成气溶胶污染,禁止开盖。
      2. 不同批号试剂请勿混合使用,在有效期内使用。
    样品处理

    参照《肉制品中动物源性成分的测定 实时荧光 PCR 法》或其他标准处理样品,制备的样本保存待用。
    样品的采集和制备是动物源性鉴别的重要步骤,为防止交叉污染,应使用一次性消耗品,研钵应经 160℃干烤2 h,其他不宜干烤或高压处理的器皿应使用 1%次氯 钠溶液浸泡。
    取样应尽量采取肌肉组织,对于同一批样品,应多点采集合并后,作为一份样品进行均质,提取 DNA。
    采样过程应快速完成,将采取的样品迅速放入组织搅碎机中进行均质成糜状,充分混匀,取 0.1 g 充分混匀的样品,采用液氮研磨或均质器均质。
    详细步骤请按照标准操作。
    产品细节图片2
    实验操作
     
    1. 模板制备(样本制备区)
    建议使用动物组织基因组 DNA 提取试剂盒等商品化试剂盒,具体过程详见产品说明书。
    1. 添加模板(模板添加区,放置于冰盒上进行)
    剪下所需测试数的已含有反应液的 PCR 管,放置在室温待解冻后,离心 30 秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入 5μL 模板,顺序为 NG、待测样品模板、PG-牛源-P。盖好配套的 PCR 管盖后,涡旋混匀 30s,离心 1min, 立即进行 PCR 扩增反应。
    1. 扩增反应(扩增及产物分析区)
    使用荧光定量 PCR 仪,荧光基团选择 FAM,淬灭基团选择 NONE。按下列条件设置扩增反应:
      PCR 循环 荧光收集位点
    去污染 37℃ 10 分钟 1 个循环
    预变性 95℃ 5 分钟 1 个循环

    扩增
    95℃ 15 秒 40 个循环
    60℃ 60 秒
    产品细节图片3
    1. 基线和阈值设定
    基线调整取 3-15 个循环的荧光信号,阈值线应超过空白对照扩增曲线的最高点。

    结果判定
    检测样品 Ct>35,曲线为直线或轻微斜线,无“S”型扩增曲线,可报告样品阴性,不含有牛源性成分或含量低于检测限;
    检测样品 Ct<30,曲线呈“S”型扩增曲线,可直接报告样品阳性,含有牛源性成分;
    检测样品 30≤Ct≤35,需进行一次重复实验,若 Ct 值>35 则为阴性,或无典型曲线,不含有牛源性成分或含量低于检测限;否则为阳性,含有牛源性成分。
    ★ NG 反应为平滑直线,PG 反应为“S”型扩增曲线,此次检测结果有效,否则无效。如重复检测结果仍为无效,请与技术支持人员联系。
    产品细节图片4

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