抗原抗体快速反应液真的能让抗原抗体快速结合吗？

在免疫检测的战场上，每一分钟都至关重要。尤其是基层医疗和POCT（即时检验）领域，我们都在追求同一个目标：更快的速度，但绝对不能牺牲灵敏度！

Western Blot（WB）作为蛋白检测的“金标准”，几乎是每个实验室的日常，但它的痛点也人尽皆知：流程繁琐、耗时太长。封闭、一抗孵育、二抗孵育这三个环节加在一起动辄就要六七个小时，很多人干脆选择一抗4℃过夜孵育，从转膜完成到拿到条带，往往要用掉整整一两天时间。

快速反应液的出现，就是想把这个时间窗压缩到原来的零头，其核心逻辑都是在不牺牲灵敏度和特异性的前提下，大幅缩短抗体的孵育时间。

（一）实验材料试剂准备：

猪肝蛋白样本、RIPA裂解液-JF5291、PMSF蛋白酶抑制剂-JS0249、5×loading buffer-JF8406、SDS-PAGE凝胶一步法配制试剂盒-JF0167、快速电泳液B-JF7414、快速转膜液-JF7416、快速封闭液-JF8516、TBST-JF8432、GAPDH兔抗（1：3000稀释）、HRP标记山羊抗兔IgG（1:3000稀释）、ECL发光液、显影液、定影液、待检测的抗原抗体快速反应液1、2、3。

（二）实验步骤1：

制样→制胶→跑胶→转膜→封闭→洗膜→孵育一抗（分别孵育10min、20min、30min）→洗膜→孵育二抗→洗膜→显影

结果：如图所示，只有2号反应液显出特异性条带（但其条带呈现较弱，需增加孵育时间）。

 

（三）实验步骤2：

制样→制胶→跑胶→转膜→封闭→洗膜→孵育一抗（分别孵育30min、30min、1h、1h）→洗膜→孵育二抗（分别孵育10min、20min、10min、20min）→洗膜→显影

结果：如图所示，第3组显影条带效果最好，第3组一抗孵育时间为1h，二抗孵育时间为10min。

（三）结论：

本公司研发的抗原抗体快速反应液经实验验证，可大大缩短Western blot时间。

本产品通过添加特定的反应增强剂，快速反应液能够促进抗原抗体分子的有效碰撞，显著缩短二者达到平衡结合所需的时间。使用快速反应液后，一抗仅需孵育1小时，二抗仅需孵育10分钟，就能达到甚至超越常规方法几个小时的效果。使用本产品稀释的抗体工作液，通常可以回收使用3次左右。这一点对于使用珍贵一抗的实验者来说尤其有价值：一瓶抗体，多跑几次。

本产品可在不牺牲信号、不产生背景的前提下，能让WB进程大幅提速。

 

Western抗原抗体快速反应液

【牌 号】JF8524

【规 格】10ml(试用装)、100ml、500ml

【产品简介】

我公司生产的Western抗原抗体快速反应液(antigen-antibody rapid reaction solution)是一种即用型溶液，用于稀释 Western blot (WB)一抗与二抗。本品与传统的抗体稀释液相比，能短时间内使抗原与抗体快速结合。使用本产品后，一抗仅需孵育1小时，二抗仅需孵育10分钟。本品通常可以回收利用3次。

产品特色：

1. 即用型稀释液，无需配制；

2. 室温孵育，快速高效；

3. 不含BSA、脱脂奶粉等动物源蛋白；

4. 不含磷酸盐、叠氮钠或硫柳汞类防腐剂。

【产品图片】

【使用方法】

1. 将一抗二抗按照抗体说明书比例分别使用本产品进行稀释。

2. 孵育一抗时，置于摇床上40-60转/分钟室温孵育1小时；孵育二抗时，置于摇床上40-60转/分钟室温孵育10分钟。

【保 存】2~8°C保存。加入抗体后，请置于-20℃保存。

【注意事项】

1. 本产品回收利用多次后，建议可适当延长孵育时间。

2. 本产品在稀释抗体后，务必置于-20℃保存。

3. PVDF膜与NC膜均可以使用本Western抗原抗体快速反应液。