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技术资料/正文
麦类壳多胞斑点病菌PCR试剂盒说明书
63 人阅读发布时间：2021-06-18 10:56
麦类壳多胞斑点病菌PCR试剂盒说明书
1、试剂盒简介货为了适应麦类壳多胞斑点病菌PCR试剂盒快速检测和疫病研究的需要，本公司参照 OIE 国际标准中规定的引物序列，经多次实验及系统优化，开发生产了本试剂盒。应用本试剂盒进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全操作简单、应用广泛和高通量检测等特点及优点。2、试剂盒组成:试剂盒组成包括核酸提取试剂和核酸扩增试剂，具体组成参见表 1：s
表 1：试剂盒组成（50test/盒）
| 组成成分 | 体积 |
| 样品 DNA 提 取 液 1 样品 DNA 提 取 液 2 |
5ml×1 管 500µl×1 管 |
| 核酸扩增试剂： DEPC 水 BP PCR 反应液 Taq 酶(5U/ul) 阴性对照 BP 阳性对照 |
5ml×1 管 750µl×1 管 40µl×1 管 1ml×1 管 1ml×1 管 |
注意事项:
1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
2.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
3.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔di一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物请避光保存。
6.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
7.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
8.本试剂不同批号组分不得混用。
9.不能使用过期产品。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
每个样品测试反应体系配制见下表 2。
表 2 每个样品测试反应体系配制表
样本处理及要求：
1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。