ATCC 4973莓实假单胞菌菌种介绍及培养说明

　　一、菌种简介

　　莓实假单胞菌'seudr:rraaaas faga假单胞菌L（I',reruamanus）的种，可引起冷藏食品如奶油，禽蛋和肉腐败。

 

　　二、培养基

　　营养琼脂即用型平板NA，成分:营养肉汁培养基(英文名:NA/NB):牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g；NACL 5.0g、琼脂20.0g(液体培养基不含),蒸馏水1.0L，PH7.6:15min灭菌注:培养芽孢杆菌时加入5mgMnSO4.H20，则有利于产生芽孢。三、保藏条件

　　斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在2-8°C保存。西林瓶请置于-20°C保存。甘油管请置于-80°C保存;请勿长期置于室温。注意事项

　　1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留；

　　①准备1支含有5-10ml液体培养基的试管和2个平板；

　　②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；

　　③吸取0.5mL无菌水打入冻干管，溶解，混匀；

　　④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；

　　⑤将平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

　　2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间；若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

　　3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

　　4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

　　5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为2-25年；

　　6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或复苏不活等情况，请在收到后2个月内联系，逾期不予受理；

　　7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

　　8）安瓿瓶开封：用浸过75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

　　9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。