杀鲑气单胞菌亚种的保存及操作方法

　　杀鲑气单胞菌感染可引起鱼类疖病。以虹鳟和大西洋鲑为对象,评估以杀鲑气单胞菌的卡那霉素耐药基因aroA突变株（BrivaxⅠ）与缺失株（BrivaxⅡ）制备的大豆肉汤和冻干制剂诱生的保护作用,并与市售治疗疖病的油佐剂死菌苗进行比较。杀鲑气单胞菌是气单胞菌Aeromonadacea科、气单胞菌属的少数不运动种类之一,在全球都有分布。对欧洲各国、美国、加拿大及澳大利亚等国家鲑科鱼类造成了毁灭性的冲击。杀鲑气单胞菌由一些不同的亚种组成,在实际操作中,根据其生化特征和基因型特征,分为两个主要的群:第一个群只包括杀鲑亚种(典型株),其余亚种为非典型株。杀鲑亚种引起系统的疖疮病感染,可在野生和养殖、海水和淡水鲑鱼的不同生长阶段发病。

　　菌种名称：Aeromonas salmonicida subsp.smithia

　　拉丁文名：Aeromonas salmonicida subsp.smithia

　　其他编号：ATCC 49393

　　培养基编号：100

　　培养温度：26℃

　　培养基编号：100

　　名称：TSA

　　备注：Trypticase soy broth 30.0g Agar 15.0g Distilled water 1000ml pH7.3

　　杀鲑气单胞菌亚种操作方法：

　　①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板；

　　②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；

　　③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管，充分溶解后重新打回液体试管中，混匀；

　　④吸取0.2mL菌悬液打入平板中，涂布均匀，重复两次获得两个平板；

　　⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

　　杀鲑气单胞菌亚种保存：

　　①根据细菌特性选择合适的培养基；

　　②培养后尽早取出放冰箱保存，注意不同细菌的保存温度，如真菌等需室温保存；

　　③保存时记录菌种鉴定结果，包括生长情况、菌落特征、染色反应等；

　　④菌种分为两套保存，一套用于保存传代，一套用于实验。定期转种，每3代鉴定一次。

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