中大六院杨孜欢教授团队结直肠癌的新靶标发现Tissue Cytometry技术揭示 SIRT2 免疫治疗应用潜力

结直肠癌（CRC）是全球第三大常见恶性肿瘤，其中 95% 的患者属于错配修复功能正常型（pMMR），这类肿瘤突变负荷低、免疫细胞浸润少，对 ICIs 治疗响应不佳。尽管免疫检查点抑制剂（ICIs）为结直肠癌提供了一种颇具前景的治疗选择，但其疗效仍有限。结直肠癌（CRCs）的低肿瘤突变负荷和免疫抑制性肿瘤微环境（TME）是导致患者对免疫检查点抑制剂产生耐药性的原因。了解癌症免疫逃逸的机制将有助于制定新的治疗策略。

2025年7月16日，中山大学附属第六医院杨孜欢教授团队在Science Translational Medicine上发表了题为Targeting SIRT2 induces MLH1 deficiency and boosts antitumor immunity in preclinical colorectal cancer models的研究文章。

且其核心结果图被期刊官网首页收录并展示

机制方面，通过基因敲低或药物抑制 SIRT2，在多种结直肠癌小鼠模型和患者来源的类器官中，可增强 CD8⁺T 细胞的浸润和细胞毒性，促使肿瘤消退。SIRT2 会与 MutL 蛋白同源物 1（MLH1）相互作用，在赖氨酸 402/443/461 位点对其去乙酰化，以阻止 MLH1 的泛素化和降解；而敲低或抑制 SIRT2 会下调 MLH1，增加 DNA 损伤并激活 cGAS-STING 通路。

此外，抑制 SIRT2 能刺激肿瘤新抗原产生，增强主要组织相容性复合体 I 类（MHC-I）表达，将肿瘤微环境重编程为免疫活性状态，并诱导持久免疫记忆。

最后，SIRT2 抑制剂 AGK2 与抗 PD-1 疗法联合使用，可增强免疫反应，使肿瘤对免疫治疗敏感，在体内显著促进肿瘤消退。该研究揭示了 SIRT2 在重塑肿瘤微环境中的作用，强调了靶向 SIRT2 让结直肠癌对免疫治疗敏感的潜力。

 

实验部分

Tissue Cytometry技术主要用于肿瘤组织中细胞的检测与分析，在探究 SIRT2 与肿瘤免疫关系的研究里，为多方面研究提供关键数据支持，助力揭示相关机制。

l  评估 SIRT2 与免疫细胞浸润的关系：应用Tissue Cytometry技术开展多重免疫荧光分析，检测肿瘤组织中 SIRT2、CD45、CD8、GZMB 和 PD-1 等蛋白的表达情况。通过对这些蛋白的定位和定量分析，发现 SIRT2 表达与 CD8+ T 细胞浸润存在关联，如 Sirt2 基因敲低后，肿瘤组织中 CD8+ T 细胞浸润增多，为研究 SIRT2 对肿瘤免疫微环境的影响提供了重要依据。

l  评估治疗效果：在评估 SIRT2 抑制剂 AGK2 的治疗效果时，利用Tissue Cytometry技术进行 mIHC 分析，结果显示 AGK2 处理后，肿瘤组织中 CD8+ T 细胞及其效应分子（GZMB、IFN-γ 和 PD-1）的表达增加，CCL5 表达也有所提升。这表明 AGK2 能够重塑肿瘤微环境，增强免疫激活，进而抑制肿瘤生长，为验证 AGK2 的疗效提供了直观的数据支持。

l  分析肿瘤微环境细胞组成变化：借助Tissue Cytometry技术，对肿瘤组织进行分析，发现 AGK2 处理后，免疫活性细胞（尤其是细胞毒性 CD8+ T 细胞和常规 1 型树突状细胞 cDC1s）显著增多，而免疫抑制细胞（如调节性 T 细胞）则明显减少。这进一步证实了 AGK2 可通过调节肿瘤微环境细胞组成，发挥抗肿瘤免疫作用。

Figure 1 :低 SIRT2 表达与结直肠癌免疫活跃肿瘤微环境（TME）的关联

检测肿瘤组织中 SIRT2、CD8 等蛋白的表达情况，如对不同患者肿瘤样本进行分析，展示出 SIRT2 在不同样本中的表达差异，以及与 CD8⁺ T 细胞浸润的关系。通过这些数据，直观呈现 SIRT2 表达与肿瘤免疫状态的联系，为后续研究奠定基础。

Figure 2 : 探究抑制 SIRT2 对细胞毒性 CD8⁺ T 细胞浸润和激活的影响

对 Sirt2 基因敲低的肿瘤组织进行分析，量化 CD45⁺、CD8⁺、GZMB⁺等细胞的浸润情况 ，并展示相关免疫标记物的表达强度变化。结果表明抑制 SIRT2 可促进 CD8⁺ T 细胞的浸润和激活，体现该技术在研究细胞免疫调节机制中的重要性。

Figure 5: 评估 SIRT2 抑制剂 AGK2 对 TME 的重塑作用。

对 AGK2 处理后的肿瘤组织进行检测。mIHC 展示肿瘤细胞中 CCL5 等蛋白的表达变化，DSP 分析则呈现肿瘤微环境中不同免疫细胞的空间分布和数量变化。这些结果显示 AGK2 可改变肿瘤微环境，增强免疫激活，抑制肿瘤进展。

Figure 6: 研究 AGK2 治疗诱导的新抗原产生和全身免疫反应

分析肿瘤组织中相关蛋白的表达，检测 AGK2 处理后肿瘤内 CD8⁺ T 细胞的激活状态以及免疫记忆相关指标的变化。结果表明 AGK2 可诱导肿瘤新抗原产生，激活全身免疫反应，为结直肠癌免疫治疗提供新方向。

Figure7 : 验证靶向 SIRT2 使肿瘤对 anti-PD-1 免疫治疗敏感的效果

对接受 AGK2 和 anti-PD-1 联合治疗的小鼠肿瘤组织进行检测，分析 CD45⁺、CD8⁺、GZMB⁺和 PD-1⁺等细胞的浸润情况。结果显示联合治疗可显著增强抗肿瘤免疫，凸显该技术在评估联合治疗效果方面的价值。