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技术资料/正文
N家速递 | ADCC、ADCP、CDC检测平台来了
185 人阅读发布时间：2025-06-26 14:45
1.背景介绍
得益于机体的先天免疫系统，抗体药Fab段可标记癌细胞表面的特异性靶点，Fc端结合免疫细胞表面的FcγR区域，进而激活免疫细胞（如NK细胞和巨噬细胞）完成杀伤或吞噬癌细胞的任务。Fc端也可以结合血清中的补体蛋白C1q并激活补体系统，最终形成膜攻击复合物来杀伤癌细胞。可以通过体外实验模拟这些免疫反应机制而检测抗体药的体外药效。
影响相关实验成功的因素有很多，主要有：
（1）靶细胞上靶点分子的表达量；
（2）抗体与靶点的亲和力；
（3）抗体亚型；
（4）靶细胞是否拥有阻碍效应细胞杀伤或吞噬的机制；
（5）抗体在靶点分子上的结合位点。
2.ADCC
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ADCC）是指表达 Fc 低亲和力受体（FcγRⅢ）的细胞通过识别抗体的 Fc 段直接杀伤被抗体包被的靶细胞。
（https://doi.org/10.1016/j.breast.2021.08.007.）
（1）实验方法
传统ADCC是以PBMC细胞，或者NK细胞作为效应细胞，通过检测靶细胞的存活来检测抗体ADCC效应的强弱，该方法重复性差，不够稳定，导致准确性差，引起结果偏差。通过构建报告基因细胞株，构建高表达FcγRIIIa(158 V)的稳转细胞系来替代NK细胞或者PBMC细胞作为效应细胞，抗体的Fab区结合靶细胞的抗原区，而Fc段和效应细胞表面的的FcγRIIIa结合，从而激活下游信号通路，诱导报告基因Luciferase的表达， Luciferase的信号值高低和ADCC活性成正比。
（2）试用样本
大分子生物药（诸如单抗、Fc融合蛋白、双抗、多抗、ADC类）为主。
（3）送样要求
建议≥1mg的目标成分，具体要求请沟通。
✦ 数据展示
（1）NK细胞为效应细胞
（2）高表达FcγRIIIa(158 V)稳转细胞系
3.ADCP
与ADCC不同，ADCP由单核细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞和树突细胞通过表达FcγRIIa（CD32a）、FcγRI（CD64）和FcγRIIIa（CD16a）来介导来吞噬疾病细胞，阻断研究表明，FcγRIIa是参与该过程的主要FcγR受体。
（DOI：10.1016/j.iotech.2022.100070）
（1）实验方法
传统ADCP检测是通过将单核细胞诱导成巨噬作细胞为效应细胞，通过检测巨噬细胞对靶细胞的吞噬率来检测抗体ADCP效应的强弱，该方法操作复杂，重复性差，不够稳定，导致准确性差，引起结果偏差。通过构建报告基因细胞株，构建高表达FcγRIIa的稳转细胞系来替代巨噬细胞作为效应细胞，抗体的Fab区结合靶细胞的抗原区，而Fc段和效应细胞表面的的FcγRIIa结合，从而激活下游信号通路，诱导报告基因Luciferase的表达， Luciferase的信号值高低和ADCP活性成正比。
（2）实验样本
大分子生物药（诸如单抗、Fc融合蛋白、双抗、多抗、ADC类）为主。
（3）送样要求
建议≥1mg的目标成分，具体要求请沟通。
✦ 数据展示
3.CDC
Complement-Depended Cytotoxicity（CDC）指带有特异抗原的靶细胞（如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞）与相应抗体结合后，在补体的参与下，引起靶细胞膜损伤，导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。利用细胞毒试验（►LDH释放法）可以检查细胞膜抗原，亦可鉴定抗体的特异性。
特异性好、背景值低；
灵敏度、信号值、信噪比高。
（2）仪器设备
多台通过验证并可以进行审计追踪的各式酶标仪。
（3）送样要求
建议≥1mg的目标成分，具体要求请沟通。