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Biochrom30+ 氨基酸分析仪检测褐篮子鱼中水解氨基酸

616 人阅读发布时间:2021-01-15 11:37


摘要:

以褐篮子鱼为原料,使用 Biochrom30+ 全自动氨基酸自动分析仪对其肌肉的氨基酸组成进行分析。结果表明褐篮子鱼肌肉中氨基酸总量的质量百分比为 17770.7mg/100g,必需氨基酸 (不含色氨酸) 占氨基酸总量的 39.37%,鲜味氨基酸占氨基酸总量的 39.27%。

一、 样品前处理

1. 所用试剂

1.1  浓盐酸,浓度≥36%,优级纯
1.2  6mol/L 盐酸:取 500mL 盐酸加水稀释至 1000mL,混匀。
1.3  水:去离子水
1.4  苯酚:须重蒸
1.5  17 种氨基酸标准品

 

2. 前处理设备

1) 分析天平:感量分别为 0.0001g 和 0.00001g
2) 水解管:耐压螺盖玻璃试管,体积为 25mL
3) 匀浆机
4) 无油真空泵
5) 干浴水解浓缩仪
6) 移液管
7) 0.22um 滤膜

3. 样品制备(参考国标 GB 5009.124-2016)

原料鱼手工去除鱼鳞、鱼皮、鱼刺和内脏,采肉后清洗、沥干,在匀浆机中打成肉糜,于 -18℃ 冰箱中冷冻保存,分析时取出解冻后使用。

4. ​​​​​​​试样水解

称取含蛋白 7.5-25mg 的试样,加入水解管中,加入 15mL 6mol/L 盐酸,继续向水解管内加入苯酚 3 滴~4 滴。冷冻 3min~5min,接到真空泵的抽气管上,抽真空(接近 0Pa),然后充入氮气,重复抽真空-充入氮气 3 次后,在充氮气状态下拧紧螺盖。 将水解管放入干浴水解浓缩仪中,110℃ 水解 22-24h,冷却、混匀、开管、转移并定容到 50ml 容量瓶中,用移液管取适量样液,在干浴水解浓缩仪中 50℃ 吹干,必要时加入少许水,重复吹干 1-2 次,加入 3-5mL PH2.2 的稀释上机用柠檬酸钠缓冲液溶解,振荡混匀后,吸取溶液通过 0.22μm 滤膜后,转移至仪器进样瓶,为样品测定液,供仪器测定用。


二、分析方法描述(Biochrom 30+)

氨基酸分析仪分析方法参数:
1) 色谱柱:Biochrom Na 型阳离子交换树脂柱,4.620cm
2) 分离程序:
3) 运行时间:经分析时间+再生时间 57min
4) 反应单元温度:135℃
5) 检测波长:570nm、440nm 同时检测


三、 样品中氨基酸含量的计算

样品测定液氨基酸的含量按式(2)计算:
ci = cs /As ×Ai ……………………(2)式中:
ci ———样品测定液氨基酸 i 的含量,单位为纳摩尔每毫升 (nmol/mL);
Ai ———试样测定液氨基酸 i 的峰面积;
As ———氨基酸标准工作液氨基酸 s 的峰面积;
cs ———氨基酸标准工作液氨基酸 s 的含量,单位为纳摩尔每毫升 (nmol/mL)。

试样中各氨基酸的含量按式(3)计算:
Xi = (ci ×F ×V ×M)/(m ×109)×100 ……………………(3)式中:
Xi ———试样中氨基酸 i 的含量,单位为克每百克 (g/100g);
ci ———试样测定液中氨基酸 i 的含量,单位为纳摩尔每毫升 (nmol/mL);
F ———稀释倍数;
V ———试样水解液转移定容的体积,单位为毫升 (mL);
M ———氨基酸 i 的摩尔质量,单位为克每摩尔 (g/mol);
m ———称样量,单位为克 (g);
109 ———将试样含量由纳克(ng)折算成克(g)的系数;
100 ———换算系数。

附、褐篮子鱼分析图谱及做样结果

 
资料格式:

Biochrom30+氨基酸分析仪检测褐篮子鱼中水解氨基酸.pdf

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