一、实验流程
制备慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒,三种质粒载体分别进行高纯度无内毒素抽提,共转染293T细胞,转染后6h更换为完全培养基,培养24和48h后,分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,病毒上清液通过超离心浓缩病毒。
二、实验材料
(一)慢病毒载体、包装细胞和菌株该病毒包装系统为三质粒系统, 组成为pspax2, pMD2G,pLVX-IRES-ZsGreen1。其中 pLVX-IRES-ZsGreen1 能表达绿色荧光蛋白(GFP)。
1、载体信息
1) 慢病毒克隆载体图谱如下: