关键词: 原代细胞 染色 试剂配置
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原理:
苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度,如果染料与含有脂类的试样接触,便有大量染料进入脂类物质的结构内,使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色,使脂质呈色。也可用四氧化锇染色,脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。
配制试剂:
1.苏丹红Ⅲ染色液:将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用;
2.甲醛钙固定液:将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml;
3.甘油明胶:将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解,再加入60ml甘油和1g苯酚,充分混匀后即得。于4℃储存备用;
染色步骤:
1.用Hanks液漂洗盖玻片3次;
2.用甲醛钙固定液固定20min;
3.用蒸馏水漂洗盖玻片3次;
4.用70%乙醇将盖玻片冲洗3次;
5.用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品,染色10—30min;
6.用70%乙醇漂洗盖片3次;
7.用甘油明胶封片后观察;
结果:
原代细胞含脂类的区域呈橘红色;
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你所在的学校的补助在全国是什么水平?
还记得你在读研时,所在学校的补助是多少吗~?读博的也可以说说呀。我的好少,有点想哭。
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科研汪也想有春天:告诉我你们的另一半都在哪里找的?
小伙伴们,请问你们的女(男)朋友是怎么找到的?(好给后来的朋友参考啊)是交友网站,还是七大姑八大姨介绍,还是同学自然成事?春天到了,我也想拥有一段甜甜的恋爱~看看你们可怜又可爱的小师弟小师妹吧!
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细胞污染
悬浮细胞复苏后培养2.3天会出现小黑点,在倒置显微镜第四挡可见细菌在活动。采用两次离心,然后加平时双倍量的抗生素,效果不佳。实验用的东西都重新高压灭菌了,培养液也重新过滤了,个人操作也更加注意了,但仍然在复苏后出现细菌,苦恼!!!
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