血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳的若干问题及解决方法
1. 电泳图谱不齐或分离不良这是电泳分析中最常见的问题,多数是由于血清滴加不均匀或滴加过多,也有因薄膜质量不合要求所致。点样这一步非常关键,一定要按操作步骤进行。首先选择质匀、孔细、染料吸附少的薄膜充分浸透缓冲液至湿度均匀无干白点。然后将滤纸吸去薄膜表面的多余水份,使薄膜含水量饱和均匀,这样才能防止薄膜表面液体含量不均,水份移动而引起标本移位。点样前注意关闭门窗和风扇,因空气流 ...
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醋酸纤维素薄膜电泳操作要点及常见差错和失败原因分析
醋酸纤维素是提纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯。由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。 种薄膜对蛋白质样品吸附性小,几乎能完全消除纸电泳中出现的“拖尾”现象,又因为膜的亲水性比较小,它所容纳的缓冲液也少,电泳时电流的大部分由样品传导,所以分离速度快,电泳时间短,样品用量少,5 μg 的蛋白质可得到满意的分离效果。因此特别适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。醋 ...
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醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质并定量
一、原理血清中各种蛋白质的等电点大都低于pH7.0,在pH8.6巴比妥缓冲液中,它们均电离成阴离子,在电场中向阴极泳动。由于各种蛋白质在同一pH环境中所带电荷多少及分子大小不同,所以在电场中的泳动速度不同。一般所来,蛋白质分子量小而带电荷多者,泳动速度快,分子量大而带电荷少者泳动速度慢,因此可以利用其泳速不同将之分开。血清中含有清蛋白、α-球蛋白、&be ...
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醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白
实验原理醋酸纤维薄膜电泳是用醋酸纤维薄膜作为支持物的电泳方法。它具有简便、快速、样品用量少,应用范围广,分离清晰,没有吸附现象等优点。目前已广泛用于血清 蛋白、脂蛋白、血红蛋白、糖蛋白、多肽、核酸、同工酶及其他生物大分子的分析检测,是医学和临床检验的常规技术。本实验以醋酸纤维素为电泳支持物,分离各种血清 蛋白。血清中含有白蛋白、α-球蛋白、β-球蛋白、γ- ...
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