关键词: RNA 试剂 RNA提取 核酸提纯
来源: 丁香园
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RNA提取对于科研人员来说并不陌生,但是要得到好的结果却不是一件很容易的事情。事实上,现在市面上的丰富的RNA提取试剂基本上可以满足科研人员的需要,为什么往往提取的RNA却容易失败呢?
RNA提取失败的主要现象有三个:提取的RNA降解、提取的RNA量偏低以及提取的RNA纯度低。究竟怎样才能确保RNA提取的成功率呢?
首先,要确定材料的可用性。尽管现有的RNA提取试剂都用抑制RNase的成分,但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键,但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂Sample Protector for RNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便。
同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差。
其次,选择合适的提取试剂是最重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时,操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的total RNA提取,Takara公司的RNAiso Plus具有诸多的成功案例。
随着2013年7月柱型提取试剂TaKaRa MiniBEST Universal Total RNA Extraction Kit的成功上市,进一步丰富了Takara RNA提取的产品线。该产品采用了独特的细胞裂解系统,无需苯酚氯仿抽提等步骤,简单快捷。组织或细胞裂解后,提取操作仅需20分钟便可完成。
对于富含多糖多酚的植物类组织提取是个难点,Takara精心研发的柱型提取试剂TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit可以轻松解决这个问题。
TaKaRa MiniBEST Plant RNA Extraction Kit可以高效地从各种简单的植物组织材料(叶片、茎、幼苗等)、富含多糖多酚的植物组织材料(果实、种子等)、真菌提取高纯度的Total RNA,适用范围广泛。
按照标准流程,本试剂盒可以有效地提取分子量大于200 nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含Small RNA (<200 nt)的Total RNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂,无需额外购买其它试剂。
近些年来,随着small RNA研究的兴起,Takara公司RNAiso for SmallRNA仅在1小时便可完成整个提取操作,为广大科研人员节省了宝贵的时间。
Takara公司在RNA提纯领域延续在qPCR和PCR领域提供更高性价比的市场定位,已经形成完整的核酸提纯解决方案。2014年6月起更有优惠套装等您体验,敬请关注!
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RNA抽提后出现奇怪情况
按步骤用50mg的小鼠肝脏提取总RNA,用预冷的研钵和-70度保存的trizol共研磨组织,氯仿分层,异丙醇沉淀,75%乙醇洗一遍,风干后depc水溶解沉淀,1.5%的琼脂糖电泳220V,20min,结果图如下,各位大神能帮我看看是什么情况吗?
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siRNA转染后目的蛋白没有减低是为什么?
我想用siRNA抑制DMT1,在吉马公司买了三个siRNA,我用的是lipo2000转染,转染前饥饿2h,转染6小时,后换成完全培养基48小时,对照使用转染GAPDH做的,接下来WB检测DMT1,却没有观察到目的蛋白的下降,请问有人遇到过相似的情况吗?应该怎么解决。
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最后溶解样品用DEOC水的量
师兄师姐好,我第一次做提取RNA的实验,不知道最后用DEPC水溶解样品时,用多少的DEPC水呢?
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