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白老师
ELISA实验技术指导
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PBS、TBS、PBST、TBST的区别
1.PBS(磷酸盐缓冲液,pH 7.4):含磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、NaCl和KCl,提供稳定离子强度和pH。适用:细胞培养、免疫组化、组织清洗(细胞洗涤型不含钙镁,利于胰酶消化)。
2.TBS(Tris缓冲液,pH 7.4):含Tris碱和NaCl,不含磷酸盐。适用:怕磷酸盐干扰的实验(如某些WB、抗体稀释)。
3.加“T”代表Tween-20去垢剂:PBST/TBST可洗去非特异性结合,降低背景,用于WB洗膜、免疫荧光洗抗体。
4.关键禁忌:检测磷酸化蛋白时,必须用TBST,不可用PBST。因为磷酸盐会干扰磷酸化抗体结合,导致信号减弱或背景增高。
*一句话选型:养细胞/组化→PBS;常规WB洗膜→PBST/TBST;磷酸化WB→TBST;怕磷酸盐→TBS/TBST。牢记磷酸盐干扰场景,避免实验失败。


