荧光定量PCR操作

新手做qPCR易踩雷！讲解超清晰实操+核心避坑点来了，小白直接抄作业，零翻车更省心

无菌操作：PCR实验对污染极其敏感，所有实验材料及操作环境应严格无菌，避免外来DNA污染。

准确量取：PCR反应体系中的各组分用量要精确，尤其是引物和模板DNA的浓度直接影响PCR效率和特异性。

引物设计：引物的设计至关重要，需保证特异性和适当的熔解温度（Tm值）。

防止气溶胶污染：加样、开盖操作应在超净工作台内完成，尽量减少气溶胶扩散的可能性。

仪器校准：确保PCR仪温控准确，过高的变性温度可能导致DNA降解，过低的退火温度或延长的时间则可能导致非特异性扩增。

结果验证：通过电泳检测扩增效果，并确认条带大小与预期目标一致，必要时可通过测序验证PCR产物的准确性。