ELISA实验不同样本类型的前处理方法

ELISA实验不同样本类型的前处理方法
一起来了解血清/血浆，组织，细胞，细胞上清在ELISA实验前的前处理方法

1、血清、血浆的前处理：

①血清：使用不含抗凝剂的采血管收集血液，收集后可在室温下静置放置1小时或2-8℃过夜使血清析出，或在2-8℃条件下，3000转离心20分钟，取上清待测；

②血浆：使用含抗凝剂（如EDTA）的采血管收集血液，采集后30分钟内，2-8℃条件下3000转离心15分钟，取上清。

2、组织的前处理：按照1g：9mL 的比例加入PBS在冰上匀浆，根据具体情况按1mLPBS：10μL的比例加入蛋白酶抑制剂，2-8℃条件下8000转离心5-10分钟，取上清待测。

3、细胞的前处理：此处理是针对细胞内因子的检测而言。弃细胞培养基，加入PBS冲洗细胞后，再加入适量PBS用细胞刮刀将细胞轻轻刮下，4℃离心去上清，获得细胞沉淀；加入细胞裂解液（含蛋白酶抑制剂），通过反复冻融或超声使细胞破碎，2-8℃条件下4500转离心10分钟，取上清。

4、细胞培养基上清的前处理：此处理是针对细胞分泌到胞外的物质检测而言。细胞上清液3000 转离心10分钟去除颗粒和聚合物，取上清上机。