操作教程丨JSR Tosyl磁珠抗体包被操作演示

※ Tosyl磁珠包被影响因素

在Tosyl磁珠和抗体结合的过程中，影响因素主要有硫酸铵用量，PH值，温度，反应时间和封闭过程等。

①硫酸铵：硫酸铵的添加是为了提高抗体的疏水性，以便抗体可以和Tosyl基团更好的接近。而过多的硫酸铵会造成抗体的变性，所以对于不同的项目加入多少硫酸铵的量需要单独地去衡量。
②PH值：Tosyl基团和氨基的反应需要在中性偏碱的条件下进行。
③温度和反应时间：Tosyl磁珠包被抗体需要在37℃高温条件下长时间反应，推荐的反应时间为18-24 小时。如果是对温度比较敏感的抗体，可以在室温条件反应，需要适当延长反应时间。使用Tosyl磁珠需要抗体可以在高温环境中长时间反应而不变性。在下图37℃和4℃条件反应的对比中，可以看出在4℃条件反应24小时，也不如在37℃反应1小时的反应度。
④封闭过程：由于Tosyl基团本身是疏水性的，如果封闭不充分，Tosyl基团会对血清中的其他组分产生非特异性吸附，造成假阳性等问题。下图以CE510封闭剂为例，展示了封闭与否，封闭时间的长短对本底和信噪比的改善。

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