手把手教您做雌鼠去势动物模型

• 原型物种：人
• 来源：卵巢切除致骨质疏松
• 模式动物品系：SPF级C57BL/6鼠，健康，雌性未孕，4~6W，体重为18g~20g.
• 实验分组：实验随机组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组，每组15只动物
• 实验周期：12 weeks
• 建模方法：

1. 小鼠3腹腔注射麻醉后仰卧，腹部脱毛。
2. 在无菌条件下于腹股沟水平沿腹中线剪开皮肤及肌层，暴露腹腔。
3. 分离子宫并摘除卵巢，清理伤口后分两层缝合皮肤及基层，待小鼠清醒后，将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养，定期观察小鼠状态及死亡情况并做好记录。
4. 术后3天，每只小鼠每天注射4万单位青霉素，防止感染。
5. 对照组仅摘除卵巢周围约1 g脂肪，而保留卵巢，其余处理相同。
6. 12W取材，X线测量各组小鼠骨密度（bone mineraldensity ，BMD），再腹腔注射麻醉，摘眼球取血，室温静止2h，4℃离心机3000r/min离心10min，分离出上层血清，置-80℃冰箱保存备用。取小鼠胫骨标本用于病理学检测。

• 应用：疾病模型

模型评价

1．卵巢去势后小鼠体重、雌二醇及骨密度变化：
去势组大鼠体重增长迅速，活动能力下降，毛色缺乏光泽而略灰暗，而对照组小鼠体重增加缓慢，毛色光亮，活动正常。去势组雌二醇水平及股骨 BMD 显著下降。

组织病理学

取各组小鼠胫骨标本，置入 10%中性甲醛缓冲固定液中（pH=7.2-7.4，4°C）固定 24-48h，再经 10%EDTA-2 Na 缓冲液（pH=7.4，4°C）脱钙，隔5-7d 更换脱钙液；脱钙完全后，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，纵向石蜡包埋，5um 连续切片，常规 HE 染色。
对照胫骨骨小梁密集，相互交织成网状；模型组骨小梁数目明显减少，骨小梁变薄，呈断裂状。

标志因子水平

有研究发现，雌激素的缺乏将导致机体自发的启动应激反应。去势后血清中IL-6 、IL-8 、IL-1β、TNF-α 的表达量增加，可以用ELISA 法检测。

统计学分析

应用SPSS软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x ±ｓ）表示，采用ｔ检验，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05表示有显著差异。