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妙顺生物
致力于成为细胞基因治疗领域内一站式服务提供商
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原代肝实质细胞(Hepatocytes)是高度分化的细胞，呈不规则多边形，核大而圆，居中，常染色质丰富，有双核或多倍体核。具有丰富的酶系及多种特异性功能，被广泛用于肝损伤、药代动力学、毒理学和致癌作用等研究。
冻存原代肝细胞vs新鲜原代肝细胞优势：
- 方便存储和运输：冻存肝细胞可长期保存，不受时间和地点限制，方便运输。
- 批次一致性：冻存肝细胞单一批次150管以上，有助于结果的准确性和可重复性。
- 细胞质量保证：可使用预先功能验证的肝细胞。
- 多供体细胞来源：可混合多个供体，也可依据项目进行定制。
- 供体对照验证：可在同一实验中比较多个批次。
- 可灵活安排实验时间：冻存肝细胞可事先测试，根项目需求灵活选择。
- 稳定性更好：冻存肝细胞可以在低温下保存，可以更好地保护细胞完整性和功能，减少细胞死亡和变性的风险。最大化还原冻存PBMC的活率与数量
所需试剂耗材及设备
缓冲液：
复苏培养基、胶原蛋白包被液、铺板培养基、维持培养基。
注：悬浮培养细胞无需使用包被液与铺板培养基。
耗材：
培养板、离心管、血球计数板、镊子、巴氏吸管、移液管等。
设备：
恒温水浴锅、生物安全柜、移液器、离心机等。
A：请将肝细胞储存在-196℃，若无液氮罐，请立即复苏培养。-80℃等温度将会给细胞造成不可逆转的损伤。
Q：冻存原代肝细胞复苏操作上应注意哪些细节？
A：如培养基预热、复苏时间、离心参数设置、细胞计数方式等环节。若细胞计数后数据与COA有差别，请立即联系我们021-64169739转802。
Q：复苏细胞计数数量少？
A：(1)若使用血球计数板计数，请确认计数板是否合适，小型动物如大鼠、小鼠肝细胞体积较大，直径可达到30nm，若计数板高度太低会导致细胞不能完全进入计数板，造成计数结果偏差，推荐使用0.1mm高度计数板；(2)若使用荧光自动计数仪，注意粒径、曝光时间及荧光阈值等参数是否合适。
Q：细胞计数活率低？
A：(1)复苏过程中操作快速，避免时间过长造成细胞死亡；(2)避免使用小量程（＜1ml）枪头，枪头直径太小会导致机械损伤，降低细胞活率；(3)细胞复苏温度37℃，请参照说明书操作，以剩余冰晶（黄豆大小）为标准；(4)离心升降速不宜过高，过高会给细胞造成机械损伤，影响细胞活力，推荐使用升5降1，具体根据离心机型号设置，尽量避免降速过高；(5)不同种属细胞最适离心机转速略有差异，请参考产品说明书，最长离心时间不超过5min。
咨询热线：021-64169739
咨询邮箱：sales@miles-bio.com
