免疫组化和免疫荧光固定剂的选择

  • 讲师介绍
  • 视频介绍

讲师介绍

biorbyt
英国Biorbyt,成立于2011年,总部位于世界科技中心之一的英国剑桥郡,专注于生命科学和生物技术领域,系英国高品质生命科学试剂供应商。主要产品有抗体、小分子、ELISA试剂盒、蛋白等。产品涉及各种科研领域,被许多知名杂志引用,并受到客户的良好反馈。与世界著名高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和医院等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往全球。 武汉博欧特生物科技有限公司,是英国Biorbyt在中国的办事处。负责英国biorbyt产品在中国区的销售、推广和全球的售后服务。武汉博欧特携手Biorbyt,致力于为客户提供一系列高质量和有绝对价格竞争力的产品,并提供专业的技术服务。 英国biorbyt已通过国际标准化组织(ISO 9001)认证。并获得了“2021年英国女王企业奖”。我们拥有多年实验室经验的专家科学家团队,以及全球强大的经销商网络渠道。

视频介绍

   免疫组化和荧光所使用的组织和细胞样品,都应新鲜取材后及时固定,否则离体太久抗原会扩散丢失或者发生组织自溶长菌。所以固定剂的选择是免疫组化实验关键的一环。
   组织或细胞的不完全固定可能会导致组织内的靶蛋白快速降解。而过度固定可能会导致抗原表位被掩盖或引起非特异性背景染色,从而影响结果观察。所以固定剂的选择和方法非常重要。

我们来举例最常用的几种固定剂:
   甲醛是最常用的固定剂,固定效果好,但是他的亚甲基会与抗原氨基交联反应,影响与抗体结合。所以甲醛固定样本需要进行抗原修复使抗原表位重新暴露,以恢复其抗体结合能力。
   用于细胞和组织固定的常用醇类是甲醇和乙醇,他们分子结构与水相似,可以取代组织中的水分子起固定作用,但是渗透性不如甲醛好,更适合膜表面抗原。醇类可以避免甲醛交联,所以固定后不需要抗原修复。
   丙tong是一种强脱水剂,可导致组织蛋白不可逆沉淀,抗原保存性好,常用于未固定的速冻组织切片,也常用于部分细胞爬片固定。

  我们一般建议固定组织厚度不超过
10毫米,固定时间醛类建议24小时以内,丙tong2小时以内,免疫组化中根据具体样本特殊性优化固定条件非常重要。因为不恰当的固定方式可能会降低或消除组织免疫反应性。