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青岛海博生物
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视频介绍
我们在进行培养基的验证时，需要用到各种阳性菌株，可由菌种保藏中心（如ATCC、CMCC、CICC等）购买获得，也可使用商业化菌株或样品分离的特征典型菌株。直接从菌种保藏中心购买菌株通常定义为0代菌株，而商业化菌株一般仅做为工作菌株使用，商家提供的报告上通常也会写明代数。接收菌株后，应建立起菌株管理台账，记录菌株的购买日期、来源、代数等信息。本次就来讲一讲菌株的接收与管理。
1.活化
在收到从菌种保藏中心购买获得的零代标准菌株后，首先要按照说明书接种至相应的培养基，在适宜条件下进行培养活化后，得到一代菌株的培养物。
2.纯度和特性检验
然后需要对活化成功的一代菌进行纯度和特性检验确认，菌株的纯度通常以平板上的菌落形态进行观察，若出现不同形态的菌落，说明菌株被污染，需重新挑取单个菌落进行纯化。菌株的形态可通过革兰氏染色后镜检观察，初步判断菌株是否正确。菌株的特性可通过生化反应进行判断和记录。
3.保存
之后我们可以采用甘油管、瓷珠菌种保藏管或制成冻干粉等方法将一代菌株置于超低温冰箱或液氮罐中冷冻长期保存，称为标准储备菌株。
4.使用及传代
取出保存的一代标准储备菌株迅速解冻，接种至相应的培养基，在合适的条件先培养活化后，得到二代菌株的培养物，此时依然要对菌株的纯度和形态进行确认，无污染变异后，可直接制备测试使用的工作菌株，也可以同样采用一代标准储备菌株的保存方法，保存为二代储备菌株。
用相同的方法活化二代储备菌株后，检查菌株的纯度和形态，可重复以上保存方法，制成三代、四代储备菌株进行保存，也可直接制备测试使用的工作菌株。通常最终制作的工作菌株不要超过五代。保存储备菌株时，也可使用斜面冷藏短期保存，但此方法通常1-3个月需进行传代活化一次。
5.建立菌株台账
实验室还应建立菌株台账，记录菌株的活化、保存、传代、验证、使用及销毁。
1.活化
在收到从菌种保藏中心购买获得的零代标准菌株后，首先要按照说明书接种至相应的培养基，在适宜条件下进行培养活化后，得到一代菌株的培养物。
2.纯度和特性检验
然后需要对活化成功的一代菌进行纯度和特性检验确认，菌株的纯度通常以平板上的菌落形态进行观察，若出现不同形态的菌落，说明菌株被污染，需重新挑取单个菌落进行纯化。菌株的形态可通过革兰氏染色后镜检观察，初步判断菌株是否正确。菌株的特性可通过生化反应进行判断和记录。
3.保存
之后我们可以采用甘油管、瓷珠菌种保藏管或制成冻干粉等方法将一代菌株置于超低温冰箱或液氮罐中冷冻长期保存，称为标准储备菌株。
4.使用及传代
取出保存的一代标准储备菌株迅速解冻，接种至相应的培养基，在合适的条件先培养活化后，得到二代菌株的培养物，此时依然要对菌株的纯度和形态进行确认，无污染变异后，可直接制备测试使用的工作菌株，也可以同样采用一代标准储备菌株的保存方法，保存为二代储备菌株。
用相同的方法活化二代储备菌株后，检查菌株的纯度和形态，可重复以上保存方法，制成三代、四代储备菌株进行保存，也可直接制备测试使用的工作菌株。通常最终制作的工作菌株不要超过五代。保存储备菌株时，也可使用斜面冷藏短期保存，但此方法通常1-3个月需进行传代活化一次。
5.建立菌株台账
实验室还应建立菌株台账，记录菌株的活化、保存、传代、验证、使用及销毁。
