单克隆抗体药物质量控制及HPLC分析技术

Protein C4色谱柱对单克隆抗体(IgG)不均一性的分析

   2014-08-19
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通过二硫苏糖醇对IgG进行还原处理后,获得其H链、L 链,然后用TSKgel Protein C4-300 进行分析,可观察到1 根L 链的吸收峰与2 根H 链的吸收峰。可推测该IgG 的H 链的氨基酸序列发生了某些变化,或H链上结合的糖链结构已发生改变。

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色谱条件
色谱柱 : TSKgel Protein C4-300 ( 4.6 mm I.D. X 15 cm)
流动相 :
A: H2O / CH3CN / TFA = 90 / 10 / 0.05 (v / v / v)
B: H2O / CH3CN / TFA = 20 / 80 / 0.05 (v / v / v)
A→B 线性梯度(45 min)
流速 : 1.0 mL/min
检测 : UV (215nm)
温度 : 25℃
进样体积 : 100 μL
样品 : 还原型单克隆抗体IgG(小鼠)

编辑: gaowei2010    来源:丁香园