人肝原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型【动物实验】 【造模机制】利用人肝脏恶性淋巴瘤新鲜组织原位移植于裸鼠,建立能完整地重现原2性肝脏恶性淋巴瘤患者自然临床病理过程的人原发性肝恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型,是研究肝脏恶性淋巴瘤的生物学特性及临床基础研究的基础。 【造模方法】 1.标本来源及处理 将无菌切取的原发性肝恶性淋巴瘤新鲜组织,置于人 RPMI-1640培养液中,清除非瘤组织,剪切成lmm组织小块,供移植用术前实验室检查甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA),乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg),乳酸脱氢酶(LDH),骨髓象及肝脏功能等各项指标。 2、原位移植与传代 裸鼠在戊巴比(30mg/kg)静脉注射麻醉下,取左上腹横切口,暴露肝脏,切开肝左叶被膜,将2粒1mm’瘤块植人肝实质内,0/10无损伤线缝合肝被膜,7-0丝线缝合腹膜,5-0丝线缝皮。术后继续饲养,当裸鼠处于濒死状态时,取其中1只荷瘤裸鼠取出移植瘤。一部分瘤组织以首代移植方法行鼠间连续传代,每次传代裸鼠5~10只不等;另一部分瘤组织液氮冻存备用,进行相关指标检测。对其他模型裸鼠需长期观察肿瘤的生长、侵袭和转移等。 【模型特点】动物模型的肝脏呈结节状异常肿大,圆形或椭圆形,表面被覆不完整结缔组织薄膜,周围有红色、不规则的充血带,毛细血管网丰富。肿瘤切面呈灰白色鱼肉状,瘤结节中间部分呈黄白色。人肝癌恶性淋巴瘤在裸鼠内自主侵袭生长,肿瘤完全局限于肝脏,肝内的侵袭散播一般出现在原位移植第二周末,以左右叶和门脉区较多,其散播灶大小不一弥漫性地出现在全肝或一个肝叶内长有多个瘤结节,并融合在一起,形成巨大的肿块。仅少数的荷瘤裸鼠有肝门淋巴结累及,受累及的淋巴结构破坏,被肿瘤细胞替代,无其他组织器官的侵袭及远处淋巴结的累及。 【应用范围】由于裸鼠肝微环境与人肝相似,使得植人的肿瘤出现类似于人肝癌恶性原发性淋巴瘤体内的散播过程,利用比较医学的手段,能通过模型研究疾病的发生机制以及肿瘤的生物学特性,为临床研究奠定基础。 【模型评估】该模型肿瘤的生物学特性较为稳定,移植瘤的组织病理学及免疫组化表型、超微结构、DNA倍体水平、染色体核型特点,和其来源原发性肝脏恶性淋巴瘤细胞几乎 完全一致。 【注意事项】建立的人肝恶性淋巴瘤常会出现广泛的散播,其一是由于肿瘤本身的高使袭恶性的潜能起作用,再则是与移植部位的微环境因素有关,如肝的特殊结构、丰富的淋巴血液循环、生化及免疫学特点等。 文章转载于北京吉田生物科技有限公司 可承接动物实验 |