今天我们来看看一篇关于非小细胞肺癌的文献,首先还是了解下背景。
众所周知,肺癌是世界上普遍认为的死亡率最高的癌症,没有之一。肺癌中约有85%是非小细胞肺癌(NSCLC)。据报道,早期肺癌患者5年存活率为70%,晚期患者5年存活率不高于20%。在如此高死亡率的情况下,找到新的靶标分子对探索NSCLC治疗有非凡意义。 之前的研究发现,泛素化涉及包括癌症在内的多种疾病,被认为是潜在的治疗靶点。OTUD1作为泛素酶的一员,是由481个氨基酸组成的,与影响诸多分子的各种生理功能有关。在乳腺癌、胰管腺癌、甲状腺癌等均有相关研究证实其作用,还有研究发现OTUD1与改善NSCLC患者的预后有关,然而目前尚不清楚是如何影响NSCLC的发展的。本文通过研究发现OTUD1在NSCLC中下调并抑制癌细胞,还发现OTUD1可以去泛素化并稳定KLF4,这种基因在不同癌症中可以是致癌基因也可以是肿瘤抑制因子。在本文研究中,OUTD1通过稳定KLF4蛋白抑制NSCLC的发展,为NSCLC患者治疗提供了一个很有希望的治疗靶点。
先看看作者用到哪些组织和细胞。
使用到的组织和细胞还是比较多,看的出来作者还是比较希望实验结果更加准确的。
接下来就看看作者的实验结果吧:
以下仅展示部分细胞实验结果(实验结果经重新调整,非原文描述):
作者经WB检测OTUD1蛋白表达量发现,患者癌组织中OTUD1比正常组织低(图片b,T为癌组织,N为癌旁正常组织),细胞系检测也发现其在癌细胞中表达明显低于正常细胞(图片c)。
随后,又通过转染方式过表达OTUD1方式研究A549与PC9细胞的功能,发现经过表达(图片d)后,细胞增殖活力下降(图片e),迁移率下降、侵袭能力降低(f)。
再通过shRNA沉默OTUD1基因(图片g),发现沉默后的细胞增殖活力上升(图片h),细胞迁移和侵袭能力升高(图片i)。
通过GEPIA数据库筛选,作者发现OTUD1与KLF4存在明显正相关,随后使用PC-9过表达和敲除OTUD1的细胞研究发现,敲除OTUD1发现KLF4半衰期显著降低,但敲除和过表达的细胞中KLP4 mRNA表达量却没有明显差异,说明OTUD1是通过降低KLF4的降解来稳定KLF4蛋白的。进一步的研究发现OTUD1是通过去泛素化KLF4来稳定KLF4蛋白的,限于篇幅,就不再展示了,有兴趣的童鞋可以查看原文。
原文:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1111/1759-7714.14320。
本文用到的细胞系,都是常用的肺相关细胞,除CALU-3稍微难培养以外,其他细胞都是比较好培养的:
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