人参皂苷(Ginsenoside)是一类固醇类化合物,又称三萜皂苷。主要存在于人参属药材中。人参皂苷被视为是人参中的活性成分,具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、 抗衰老等作用,因而成为研究的目标。本方法可用于检测人参、西洋参、花旗参等参类及其制品中的人参皂苷,方法简单,易于操作。
称取1 g人参样品,加水50 mL,超声20 min,取出,离心后取上清液于另一干净试管,重复提取一遍,合并提取液,摇匀,取10 mL,待净化。 备注:加标样品为经预处理不含本底的空白样品。
活化:向大孔树脂净化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔树脂净化柱。 上样和洗脱:将待净化液的样品加入已经活化好的大孔树脂净化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔树脂净化柱,弃去淋洗液。用25 mL 70%甲醇水溶液洗脱大孔树脂净化柱, ,收集洗脱液,水浴蒸干,残渣以甲醇溶液定容,过PTFE滤膜,上机。
仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000 色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm) 流动相:A:水 B:乙腈 洗脱方式:梯度洗脱,见表1 流速:1.0 mL/min 柱温:35℃ 进样量:20 μL 检测器:紫外检测器 检测波长:203 nm 表1 梯度洗脱程序
时间/min |
A/% |
B/% |
0.0 |
82 |
18 |
40.0 |
79 |
21 |
42.0 |
74 |
26 |
46.0 |
68 |
32 |
55.0 |
60 |
40 |
65.0 |
60 |
40 |
75.0 |
0 |
100 |
80.0 |
82 |
18 |
90.0 |
82 |
18 |
- 加标回收实验结果
表2 三种人参皂苷的加标回收结果
目标物 |
加标浓度 (mg/kg) |
回收率(%) |
平均回收率(%) |
RSD(%,n=3) |
RG1 |
500 |
89.34 |
87.03 |
85.74 |
87.37 |
2.09 |
RE |
500 |
98.38 |
106.0 |
103.4 |
102.6 |
3.79 |
RB1 |
500 |
95.17 |
90.86 |
92.19 |
92.74 |
2.38 |
(2)三种人参皂苷色谱图
图1 三种人参皂苷的色谱图
货号 |
描述 |
包装 |
COD101124000 |
Copure®D101大孔树脂净化柱,4g/12mL |
50支/盒 |
BN24 |
biocomma® 智能水浴氮吹仪 |
1台/箱 |
SF130-22-PTFE |
PTFE针式过滤器,直径13 mm,孔径0.22 μm,有机系 |
100个/盒 |
SC2-1 |
2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425 |
100个/盒 |
V2-AL |
2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425 |
100个/盒 |
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