pLVX-Puro质粒载体使用说明
2021-12-30 09:02点击次数:9641
关键词:基本信息
智立编码:2021122910411343356
启动子:CMV
复制子:pUC
感受态:Stbl3
培养温度:37度
质粒属性
质粒宿主:哺乳细胞,慢病毒
质粒用途:蛋白表达
片段类型:ORF
片段物种:空载体
原核抗性:Amp
筛选标记:Puro

载体说明:
pLVX Puro是一种基于HIV-1的慢病毒表达载体。从载体中提取的慢病毒颗粒可以让你在几乎任何类型的细胞中表达你感兴趣的基因,甚至是原代细胞。基因的表达由组成性活跃的人巨细胞病毒立即早期启动子(PCMV IE)驱动,该启动子位于多克隆位点(MCS)的上游,允许感兴趣的蛋白质组成性高水平表达。
pLVX Puro包含生产复制不全慢病毒所需的所有病毒处理元件,以及提高病毒滴度、转基因表达和整体载体功能的元件。土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件(WPRE)促进RNA处理事件,增强病毒和转基因RNA的核输出(1),导致包装细胞的病毒滴度增加,并增强目标细胞中感兴趣基因的表达。此外,该载体包含Rev应答元件(RRE),该元件通过增强未经切割的病毒RNA从细胞核的转运来进一步提高病毒滴度(2)。最后,pLVX Puro还包含一个中央息肉道(cPPT)元件,在靶细胞感染期间增加病毒基因组的核输入,从而改善载体整合和更有效的转导(3)。
除了慢病毒元件外,pLVX Puro还包含一个受鼠磷酸甘油酸激酶(PGK)启动子(PPGK)控制的嘌呤霉素抗性基因(Puror),用于选择稳定的转导子。该载体还包含用于在细菌中繁殖和选择的pUC复制源和大肠杆菌氨苄青霉素抗性基因(Ampr)。



