1. 什么是细胞系鉴定? 所谓细胞系鉴定即通过 STR(短串联重复)图谱所建立细胞系的遗传特征。一株细胞系的遗传特征确立后,细胞系可以通过定期的检测,以防止出现细胞系被误认或交叉污染的情况。
现在很多机构都已经认识到这个的重要性,ATCC和FDA,这些机构要求对用于制药领域的实验中所使用的材料 — 诸如细胞系 — 应该进行“身份鉴定”和纯度测试。很多杂志也要求使用细胞系的文章提供STR指纹图谱数据。 FDA建议研究人员在培养细胞的较早阶段(细胞培养第一周)来鉴定细胞系的身份。细胞在被冻存前应再一次进行鉴定;对于活跃生长的细胞,每两个月应鉴定一次;文献发表前也应对细胞系身份进行鉴定。 如果一个实验室使用不止一种细胞系,则应在实验最开始时,就要对所有的细胞系进行鉴定,以便排除交叉污染。 这样将减少由于细胞系发生交叉污染或身份误认,将导致实验数据的无效或数据误导。 3.如何进行细胞系鉴定? 细胞系鉴定目前主要基于国际身份认证委员会的标准。依据该标准,可以通过多重荧光 PCR 技术,对人源 8 个 STR 位点以及 1 个性别决定位点进行检测。 4.什么时候需细胞系鉴定? 1)当建立或获得一个新的细胞系时; 2)一个涉及到细胞试验项目开始/结束时; 3)在细胞冻存之前,或细胞已连续培养 2~3 个月时; 4)发表文章或申请课题经费前; 5)细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大时; 6)当实验室使用超过一种细胞系时,所有细胞系最好先鉴定以排除交叉污染的可能。 END
|