【前情回顾】Abnova实力上新–靶向新冠病毒S蛋白的中和抗体
今天,你打新冠疫苗了吗?自武汉官宣免费接种新冠疫苗以来,大家积极响应,纷纷预约疫苗接种。这不,小编昨天就接种了新冠疫苗第一针,疫苗与剂次(Vaccine/Dose):新冠疫苗(Vero细胞)。这是一种灭活疫苗,通过把新冠病毒培养扩增后加以杀灭,然后把灭活病毒颗粒注射到人体中,诱导人体产生免疫反应。目前我国已有4款新冠疫苗获批附条件上市,按疫苗生产工艺可分为2种,分别为北京生物制品研究所有限责任公司、武汉生物制品研究所有限责任公司和北京科兴中维生物技术有限公司生产的新型冠状病毒灭活疫苗和康希诺生物股份公司生产的腺病毒载体疫苗。你知道你接种的是哪一款新冠疫苗吗?
新冠疫苗接种如火如荼,相信距离我们面对面相见的日子也不远了。新冠病毒,这个一度曾经让大家陷入水深火热的罪魁祸首,今天我们就来全方位盘点一下让新冠病毒无所遁形的科研工具:
(1)COVID-19 人IgM IgG血清抗体快速检测试剂盒(CE认证)
原理:新型冠状病毒感染机体后,随着感染后病程的发展,人体免疫系统会针对病毒的结构蛋白产生特异性抗体,其中IgM是机体感染后产生的早期抗体,提示现阶段被感染的状态,而IgG则提示存在既往感染史。因此IgM IgG抗体检测是新冠病毒诊断的有效方法之一,同时监测IgG和IgM抗体,能使诊断更加准确。基于胶体金免疫层析的试纸包含胶体金标记的重组新冠病毒抗原和质量控制鸡IgY抗体胶体金标记,两条检测线(G和M线)和一条质量控制线(C)固定在硝酸纤维素膜上。 M用山羊抗人IgM抗体固定,用于检测新冠病毒IgM抗体。G用山羊抗人IgG抗体固定,用于检测新型冠状病毒IgG抗体。质量控制抗体山羊抗鸡IgY抗体固定在C线上。当样本加到加样孔中,该样本在层析作用下将沿检测卡向前移动,如果样本中含有新冠状病毒IgM抗体,则该抗体与胶体金标记病毒抗原结合,形成夹心复合物,将会呈现阳性结果。如果样本中含有新型冠状病毒IgG抗体,则该抗体会与胶体金标记新型冠状病毒抗原结合,形成夹心复合物,将会呈现阳性结果。C线用于判断层析过程是否顺利。
(2)COVID-19人IgM IgG抗体ELISA检测试剂盒
原理:基于间接ELISA方法定性检测人血清中IgM/IgG抗体。试剂盒提供的微孔板上包被有新冠病毒的结构蛋白(刺突受体结合蛋白-RBD和核衣壳蛋白-nucleocapsid),如果待测样本中存在新冠病毒IgM/IgG抗体,就会与孔底的病毒抗原进行特异性结合,样本中新冠病毒IgM/IgG抗体从而被固定在板底,加入HRP标记的抗人IgM/IgG二抗可以特异性识别IgM/IgG抗体的Fc段,最后TMB底物液在HRP催化下显色,加入终止液终止显色后,在酶标仪OD450读取吸光值,即可检测到样本中是否有人IgM IgG抗体。
(3)COVID-19抗原快速检测试剂盒(CE认证)
原理:依据双抗夹心ELISA原理,样本滴加在样本垫上,通过液相层析依次通过结合垫,NC膜上的检测线(T线)和质控线(C线)。结合垫内含有胶体金标记的新冠病毒核衣壳蛋白鼠单抗,可以与样本中的抗原(新冠病毒蛋白)发生结合,当液流到达检测线(T线)时,固定在这条线上的第二种抗原特异性抗体(新冠病毒核衣壳蛋白人单抗)再次与抗原结合,将会呈现阳性结果。质控线(C线)包被山羊抗鼠多克隆抗体,可以结合样本垫中抗体,用于判断层析过程是否顺利。
(4)COVID-19病毒抗原ELISA检测试剂盒
原理:N蛋白(核衣壳蛋白)是冠状病毒中重要的结构蛋白。在病毒体组装过程中,N蛋白与病毒RNA结合并导致螺旋核衣壳的形成。核衣壳蛋白是一种高度免疫原性的磷蛋白,与病毒基因组复制和调节细胞信号通路有关。由于N蛋白的序列保守性和强大的免疫原性,毒株间一般差异较少,N蛋白常被作为冠状病毒诊断检测工具。Abnova提供的新冠病毒N蛋白ELISA检测试剂盒基于双抗夹心ELISA检测法,试剂盒中的微孔板上包被有N蛋白抗体,可以将样本中的N蛋白特异性固定在板底,然后加入N蛋白检测抗体,加入与检抗特异反应的酶联二抗,通过底物显色,即可实现对新冠病毒N蛋白的定量分析。
S蛋白(刺突蛋白)是冠状病毒最重要的表面膜蛋白,决定了病毒的宿主范围和特异性,是宿主中和抗体的重要位点以及疫苗设计的关键靶点。S蛋白含有两个亚基,S1和S2。其中S1主要含有受体结合区(RBD),可以与受体宿主细胞的受体结合,通过RBD的基因重组或突变可以实现不同宿主间的传播,并导致较高的致死率。S2则含有膜融合过程所需的基本原件。Abnova提供的新冠病毒S蛋白ELISA检测试剂盒基于双抗夹心ELISA检测法,试剂盒中的微孔板上包被有S蛋白抗体,可以将样本中的S蛋白特异性固定在板底,然后加入S蛋白检测抗体,加入与检抗特异反应的酶联二抗,通过底物显色,即可实现对新冠病毒S蛋白的定量分析。
(5)COVID-19中和抗体检测试剂盒
Abnova可提供两种新冠病毒中和抗体的检测试剂盒:一种是基于蛋白反应的检测,一种是基于细胞反应的检测。
原理:基于蛋白反应——利用竞争法ELISA原理,首先在微孔板板底包被上人的ACE2重组蛋白,然后加入样本和新冠病毒的RBD蛋白,当样本中存在中和抗体时就会与刺突RBD蛋白特异性结合,从而阻止了RBD与预包被板底的ACE2蛋白的结合,最终微孔板中颜色的深浅与待测物中中和抗体的浓度呈负相关,实现对新冠病毒中和抗体的定量检测。基于细胞反应——试剂盒可提供稳定表达ACE2的293T细胞以及能表达新冠病毒S蛋白和 Luciferase 荧光素酶的假病毒。假病毒可以特异性侵染表达ACE2的293T细胞,并发出荧光,从而可以便捷观察结果,并通过化学发光酶标仪检测,实现对荧光素酶的定量分析。但是,当样本存在新冠病毒中和抗体时,可以特异性与假病毒表达的S蛋白结合,从而阻断了假病毒对293T-hACE2细胞的侵染,细胞中荧光素酶信号水平即会相应降低。
自新冠疫情蔓延以来,COVID-19诊断方式已从核酸检测、抗体检测快筛、病毒抗原检测快筛、中和抗体定量检测,快速转换发展,Abnova从未放慢脚步,从产品研发,申请欧盟认证,到获得客户信赖,一路的成长都是品质的见证:
2020年6月Abnova COVID-19病毒萃取试剂组接获第二笔十万人份检测订单,并且第一笔十万人份检测订单于开始安排出货;2020年10月Abnova COVID-19 IgM IgG快速检测试剂月产能达10万人份;2020年12月Abnova完成COVID-19 病毒抗原检测快筛试验,灵敏度100%,特异性96%;2021年1月Abnova新聚焦发展第一种吸入治疗性和鼻腔喷雾预防性COVID-19人类化抗体;2021年3月研究发现Abnova COVID-19人类化中和性抗体可有效抵御英国与南非变种病毒;2021年3月Abnova申请COVID-19 Self-Amplifying mRNA通用型疫苗专利并建立GMP制造合作伙伴。。。。。。(未完待续)
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