absin细胞培养常用生化试剂有:PBS,Hank’s液,D-Hank’s液,EDTA,胰蛋白酶,青霉素、链霉素。 1、磷酸盐缓冲PBS 磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由於它们是二级解离,有二个pKa值,所以用它们配 制的缓冲液,pH范围最宽: NaH2PO4: pKa1=2.12, pKa2=7.21 Na2HPO4: pKa1=7.21, pKa2=12.32 配酸性缓冲液: 用NaH2PO4,pH=1~4, 配中性缓冲液: 用混合的两种磷酸盐,pH=6~8, 配碱性缓冲液: 用Na2HPO4,pH=10~12。 因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,一般情况下用钾盐比钠盐好(使用SDS-PAGE时除外)。
2、Hank’s缓冲液 Hank’s液是常见的平衡盐溶液(BSS)之一。D-Hank’s液则是无钙镁离子的Hank’s液(也有资料认为除了 不含钙镁离子之外也不含葡萄糖)。BSS与细胞生长状态下的pH值、渗透压及无菌状态一致,且配方简单 ,是组织培养基本用液,常用于配制培养基及其他用液,或洗细胞等,细胞在这种BSS中可生存几个小时。 Hank’s液是组织培养基本用液,常用于配制培养基及其他用液,或洗涤组织、细胞等。细胞在Hank’s液 中可以在一段时间内维持一定的活力。另外Hank’s液还可以用于终止EDTA的作用。配制胰酶液或者是胰酶 /EDTA的基础液都是D-hanks 液,而不能使用Hank`s液。这是由于钙离子和镁离子会影响胰蛋白酶的活性 ,也会阻碍EDTA的作用。 对于Hank’s与D-hank’s液的配制,不同的文献有不同的配方,两者最主要的区别就是D-hank’s液中没有 钙镁离子。 3、Hank’s与磷酸盐缓冲液的应用 PBS:磷酸缓冲盐溶液——具有pH缓冲作用的等渗盐溶液。多用于非活体。 Hank’s:平衡盐溶液——无机盐和葡萄糖浓度接近大部分动物(植物)细胞的水平,可作为动(植)物细 胞短期培养(保存)。多用于活体。 Hank’s液中盐成分较PBS复杂,且有葡萄糖,可为细胞提供简单的营养,而PSB中只有磷 酸根,钠,钾,氯离子,只是最简单的盐平衡缓冲液,不能为细胞提供暂时的营养。
货号 |
名称 |
abs9257 |
Hanks平衡盐溶液(不含Ca2+ Mg2+,无酚红) |
abs9258 |
Hanks平衡盐溶液(含Ca2+ Mg2+,无酚红) |
4、其他细胞培养相关试剂 酸盐缓冲系统:一般细胞培养液的pH在7.0-7.4之间。由于碳酸盐pH缓冲系统是一种生理pH缓冲系统,大多 数培养液用它来保持稳定的pH。为了维持稳定的pH,培养箱中的二氧化碳需要维持在2-10%之间,以保持 培养液中溶解的二氧化碳的浓度。 EDTA:常用的阳离子螯合剂。组织细胞间存在钙黏蛋白(一类Ca2+依赖的细胞黏着糖蛋白)。而EDTA可 以通过螯合金属离子,破坏Ca2+或Mg2+依赖性的细胞黏着。 胰蛋白酶:水解细胞间的蛋白质,方便形成细胞悬液。消化细胞时可以只使用胰蛋白酶,也可以胰蛋白酶与 EDTA同时使用。胰蛋白酶的消化作用可以通过加入血清终止。EDTA的作用可以通过加入Hank’s液终止。 青霉素与链霉素一般合称双抗,青霉素主要对革兰氏阳性菌有效。链霉素对许多革兰阴性杆菌作用良好。 absin细胞培养相关其他试剂:
Absin特色产品线(全部现货): WB相关:ECL发光液、预染marker、预制胶;IHC相关:二抗试剂盒、组化笔;IP/CoIP试剂盒;激动剂/抑制剂;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡试剂盒;呼吸爆发试剂盒;ELISA试剂盒;重组蛋白;抗体: 二抗、标签抗体、对照抗体;定制服务(抗体/多肽/蛋白/标记/检测)... 爱必信(上海)生物科技有限公司 联系邮箱:info@absin.cn 公众平台:爱必信生物 |
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