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随着生物科技的发展,细胞治疗和基因治疗业已成为重要的前沿疾病治疗技术,利用RNA体外合成技术制备的mRNA疫苗在2020年突发的COVID-19传染病上产生了巨大的影响。很多公司如美国Moderna、德国CureVac、BioNTech等均已经开展了其他疾病如肿瘤、传染病、慢性病等治疗性mRNA疫苗和药物开发。
图:基于mRNA(癌症)疫苗开发中的开创性阶段和里程碑[1]
表1:国内外主要的mRNA疫苗公司概况
注:以上信息均来自对应公司官网信息
体外合成RNA(IVT)主要是以DNA为模板通过体外转录得到,常用的是以线性化质粒DNA或PCR扩增产物为模板利用RNA聚合酶在体外转录合成。主要过程是利用含有T7启动子(TAATACGACTCACTATAGGG)或SP6启动子(ATTTAGGTGACACTATAG)序列的DNA为模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的条件下,以NTP为底物合成与模板DNA中一条链互补的mRNA,简单快速获得大量的mRNA分子,通过在5’端加上帽子结构和3’端加ployA尾加强mRNA的稳定性。
图:体外转录(IVT)mRNA生产和装配过程[2]
体外合成RNA应用
体外合成RNA你是否有以下困惑 (1)如何获得转录模板? (2)为什么自己配置反应体系无论如何优化都无法获得足够高的产率? (3)有没有一款包含全套反应试剂的Kit,让我不在为体系配置而烦恼? (4)需要一款性价比高的T7 Kit,让研究经费不在是我科研路上的拦路虎? (5)有没有一款试剂盒适用于多种类型RNA的合成? …… 翊圣生物经过匠心研发,开发出的高性价比的T7高产量体外合成试剂盒包含一整套的RNA合成所需试剂,并配有详细的教程。本试剂盒可以合成长转录本以及短转录本,以1μg的模板投入量可以产生100-200 μg的RNA,适用于单链 RNA合成(包括siRNA等各类RNA前体及RNA探针)和以Cap analog为引物合成Capped mRNA。 Hifair® T7 High Yield RNA Synthesis Kit测试数据
图:不同长度转录-时间梯度电泳图
短片段:2-4h可有效转录 长片段:1-2h可有效转录 图:不同目的片段的转录产量 不同长度RNA转录 RNA转录品质测定(安捷伦2100) 图:不同长度RNA转录及品质测试 翊圣生物提供您高品质、高性价比的T7合成试剂盒,助力您的科学研究和药物及疫苗的开发,共同为人类的未来健康事业奉献一份力量。 产品订购
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【1】Verbeke, Rein & Lentacker, Ine & De Smedt, Stefaan & Dewitte, Heleen. (2019). Three decades of messenger RNA vaccine development. Nano Today. 100766. 10.1016/j.nantod.2019.100766. 【2】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, ,Tailoring mRNA Vaccine to Balance Innate/Adaptive Immune Response,Trends in Molecular Medicine,Volume 26, Issue 3,2020,Pages 311-323, 关于翊圣生物 上海翊圣生物科技有限公司(Yeasen Biotech Co., Ltd)成立于2009年,是国家高新技术型企业,长期专注于分子酶原料及建库试剂盒等产品的研发和生产。 我们的目标让下游企业节省更多的成本,为中国精准医疗的发展贡献自己的力量。 翊圣生物拥有先进的分子酶双向技术平台、大规模蛋白发酵纯化技术平台、高效抗体筛选技术平台,目前已成功开发各类诊断分子酶、二代测序建库酶等40余种,并实现工业放大。翊圣生物开发的PCR类、NGS类、体外诊断(IVD)和相关酶原料等产品获得了广大客户的认可。此外,我们还为工业客户提供定制化开发服务,以满足个性化需求 |