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一、关于特异性抗体的挑选:特异性的挑选首要需求考虑四个方面:蛋白特异性、种属特异性、试验办法特异性、符号物的特异性。 1、蛋白特异性:针对需求检测的蛋白查找抗体,几个细节要差异,重组表达的蛋白和内源性蛋白的检测,对抗体的要求是不相同的,留神查看抗体说明书的检测说明。假定重组蛋白不是全长表达,则需求留神抗体的免疫原区域是否在重组蛋白区域内。 2、种属特异性:同种蛋白不同物种,有着或大或小的差异。现在大部分商品化抗体都是以人源蛋白序列为模板重组蛋白或规划多肽抗原的,依据蛋白的同源性的情况与其他种属发作交叉反响。需求参照说明书注明的可反响种属信息。一些稀有种属很难找到抗体,能够经过蛋白的序列比对,挑选同源序列免疫的抗体。 3、试验办法特异性:现在运用抗体的试验办法有许多,不同的运用办法过程中,由于对蛋白样品的处理办法不相同,蛋白的含量有差异,对抗体的辨认表位和效价要求都是不相同的。具体的依据说明书注明的产品应用办法进行挑选。 4、符号物的特异性抗体一般依据试验操作的试验办法不会运用带有符号的一抗,比如WB、IHC等,都是经过二抗类的试剂符号抵达效果出现的意图。可是依据仪器剖析的一些试验,或许就会运用到直接符号的一抗,比如流式试验。那么需求了解到自己即将运用的仪器能检测到的荧光规划,不通的参数要求挑选对应的符号物。在免疫荧光双标试验中,需求选配不同的荧光物。 |