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AxyPrep 无内毒素质粒大量试剂盒 本试剂盒采用 SDS 碱裂解法,结合 DNA 制备膜选择性吸附 DNA。同时采用特殊溶液(Buffer ETR 和 Buffer PF)有效去除内毒素,可从 80-200 ml 细菌培养物中提取出多至 500 礸 高纯度质粒 DNA,其内毒素水平控制在 0.1 EU/礸 以下。 一、 试剂盒组成、贮存、稳定性
RNase A:50 mg/ml,室温可贮存 6 个月,长期贮存于-20℃。 Buffer S1:细菌悬浮液。加入 RNase A 后,混合均匀,4℃贮存。 Buffer S2:细菌裂解液(含 SDS/NaOH),室温密闭贮存。 Buffer S3K:中和液,室温密闭贮存。 Buffer B:DNA 结合溶液,室温密闭贮存。 Buffer W1:洗涤液,室温密闭贮存。 Buffer W2 concentrate:去盐液。使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用无水乙醇或 95% 乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。 ET-free water (70% Ethanol):使用前,按试剂瓶上指定的体积加入无水乙醇(可用无水乙醇或 95% 乙醇)。混合均匀,室温密闭贮存。 Eluent A:洗脱液。室温密闭贮存。 Buffer ETR:内毒素去除液。室温密闭贮存。 Buffer PF:分相缓冲液。室温密闭贮存。
二、 注意事项
5.加 10 ml 4℃预冷的 Buffer B,温和并充分地上下翻转混合 10 次,8,000×g 离心(4℃)10 min。 步骤 6-9 可以选择离心法或负压法。
6A. 先将大量制备管放入 50 ml 离心管中。吸取步骤 5 中的混合液,转移到大量滤器(Maxiprepsyringe filter)中。 7A. 插入推杆,垂直向下缓慢将滤液推注至大量制备管中,≥6,000×g 离心 5 min。 8A. 弃滤液,加 12 ml Buffer W1 至制备管中,≥6,000×g 离心 5 min。 9A. 弃滤液,加 14 ml Buffer W2 至制备管中,≥6,000×g 离心 5 min。
6B. 正确连接负压装置,将大量制备管插到负压装置的插口上。 7B. 吸取步骤 5 中的上清液,转移到大量滤器中,插入推杆,垂直向下缓慢将滤液推注至大量制备管中,开启并调节负压至-25 ~ -30 英寸汞柱,缓慢吸走管中溶液。 8B. 保持负压,加 12 ml Buffer W1,吸尽管中溶液。 9B. 保持负压,加 14 ml Buffer W2,吸尽管中溶液。
*溶液可能会出现微弱的浑浊现象,此为正常现象。
糖原含量试剂盒说明书 葡萄糖含量试剂盒说明书(测组织、细菌或细胞) |