近期,OriGene 发起了一项针对科学家如何选择蛋白的问卷调查,全球共有 900 多名科学家参与了这项问卷。 下面是本次问卷的一些问题: · 你是怎样获得蛋白的? · 你是怎样寻找蛋白的? · 你挑选蛋白产品时的首要考虑因素是什么? · 你的蛋白下游应用是什么? 1. 越来越多的科学家更倾向于从蛋白生产商直接购买蛋白 根据我们的调查结果,只有 42% 的科学家仍然选择自己去表达蛋白,而 58% 的科学家表示他们要么「从供应商处直接购买目录蛋白」,要么选择「通过蛋白服务公司进行定制生产」。这一结果与我们所观察到的行业总体趋势一致,即更多的外购和更少的自产。很明显,外购蛋白相比自产蛋白是有一些优势的。 · 便捷。许多供应商已经生产了蛋白并且留有库存,所以只需在网上点击几下,蛋白就会在发往你的路上。比如您就可以从 OriGene 的 20,000 多种目录蛋白中寻找您的蛋白。 · 节约成本。蛋白的纯化通常需要高质量的 DNA,优化的细胞条件和许多其他下游材料,如果研究人员只需要纯化一种蛋白用于实验,这样的成本是昂贵的。OriGene 的科学家使用优化的工艺可以最大化蛋白的表达量并进行批量纯化。因此,外购蛋白通常比自产蛋白更能节约成本,而且,来自同一批次的蛋白也具有更高的品质一致性。 2. 引用文献,Google 搜索,同事推荐,依旧是科学家寻找蛋白的主流途径 综合来说,86% 回答此问卷调查的科学家表示:引用文献,谷歌搜索和同事推荐仍然是最常用的蛋白选择方式。OriGene 服务科研市场已经超过 20 年,文献引用也已超过 20,000 篇。 3. 科学家首要关注的还是蛋白的功能活性 近 50% 的科学家选择了将蛋白的功能活性作为选择蛋白产品的主要决定因素。蛋白的功能由其结构和修饰决定。与天然来源的蛋白不同,重组蛋白由具有不同内部环境的宿主细胞制备。这些环境可能缺乏蛋白正确折叠及修饰所需的条件。所以,问题是,尤其当供应商没有活性数据时,我们该如何选择功能性的活性蛋白? 一般来说,有一些因素会影响蛋白的功能。 · 克隆的质量:由序列验证的 ORF 克隆制备的蛋白将具有保证的氨基酸(AA)序列。通过修饰克隆的序列,可以生产跟天然蛋白具备相同序列的蛋白。最好在购买蛋白前检查一下克隆的序列,以确保您购买到正确的蛋白。 · 宿主细胞种类:来自相同物种的细胞倾向于产生具有接近天然结构和翻译后修饰(PTM)的蛋白,由这些细胞产生的蛋白更可能是具有功能活性的蛋白。例如,OriGene 蛋白主要是人细胞(HEK293T)中表达的人源蛋白。大量的体外和体内实验已经证明这些蛋白是有活性的。 · 优化的纯化条件:强溶剂如高浓度 SDS 往往会在纯化过程中导致蛋白活性丢失。当没有功能数据时,用温和条件纯化的蛋白往往是一个更好的选择。
4. 科学家使用重组蛋白主要的下游应用是什么? 重组蛋白广泛用于生物学研究。根据我们的调查,蛋白的一个首要应用是体外功能实验。也可用于研究蛋白质- 蛋白质相互作用,抗体验证,动物体内研究和蛋白质微阵列。一些应用如功能性实验和体内研究需要明确蛋白的天然结构和功能。有些可能仅需要蛋白序列准确即可,比如用于抗体验证的 WB 对照。
作为蛋白产品和服务的主要供应商,OriGene 提供超过 20,000 种重组蛋白,覆盖 60% 以上的人类蛋白质组。这些蛋白广泛用于不同的应用中。除了我们的目录蛋白质,我们还提供全面的蛋白质服务,以满足每位科学家的特殊需求。 |