抗 PLA2R 抗体的发现
膜性肾病(MN)是导致成年人肾病综合征的最常见原因,按照病因可以分为原发性膜性肾病(pMN)和继发性膜性肾病(sMN)。其中原发性膜性肾病在 MN 中占 70% - 80%。由于致病原因不明,pMN 又称为特发性膜性肾病(IMN)。
2009 年,Beck 的研究小组首次报道了 IMN 患者血清中的抗 PLA2R 抗体。他们通过非还原性 Western blot 在 70% 的 pMN 患者血清中,检测到一 185kDa 蛋白。随后通过质谱检测该条带,确认该蛋白为 M 型磷脂酶 A2 受体(PLA2R)。最终,此项研究确定了 PLA2R 为人类 MN 的靶抗原。
pMN 患者中抗 PLA2R 抗体的流行现状
自从 2009 年抗 PLA2R 抗体被发现后,来自德国、美国、荷兰、西班牙、韩国、日本、中国、捷克等多个国家的大量研究显示,pMN 患者血清中抗 PLA2R 抗体的阳性率为 52%-98%。2014 年 KDIGO 在《肾小球肾炎临床诊疗指南》中重新对 MN 进行分类定义,将 pMN 分为两类:一类表达抗磷脂酶 A2 受体(PLA2R)抗体;另一类是病因不明的特发性膜性肾病(IMN)。
抗 PLA2R 抗体的临床价值
MN 的特点是肾小球基底膜表面的免疫复合物沉积,诊断主要通过肾脏穿刺,组织学检查或肾组织电镜检查。但病理检测不能区分原发性膜性肾病(pMN)和继发性膜性肾病(sMN),需进一步应用免疫组化检测 PLA2R 抗原明确分类,检测结果不提示疾病的严重性,而且与疗效无关。抗 PLA2R 抗体血清学检测不仅为临床提供以下有效诊疗依据,弥补组织病理学不足,还具有简便易行,又可反复采样的优点。
(1)抗 PLA2R 抗体是 pMN 的高特异性和灵敏度的血清学标志物,可以用于区分 pMN、sMN:抗 PLA2R 抗体在 70% 的 pMN 病例中检出,偶见于 sMN 或正常人。(Hoxha, Harendza et al. 2011, Dahnrich, Komorowski et al. 2013)。
(2)与疾病活动度相关,用于评价病程:研究表明抗 PLA2R 抗体滴度与疾病活动性(蛋白尿水平)相关,高滴度的抗体常常与 pMN 的严重病程相关 (Hofstra, Beck et al. 2011, Hofstra, Debiec et al. 2012)。
(3)疗效监测、指导用药:抗 PLA2R 抗体滴度下降提示免疫抑制治疗的成功,且抗体滴度的下降早于(至少 3 个月)蛋白尿水平下降。利于指导及时停药,避免过度用药。同时,疾病的复发也伴随着抗 PLA2R 抗体再次出现 (Beck, Fervenza et al. 2011, Hoxha, Thiele et al. 2014)。高滴度的抗 PLA2R 抗体常常是 pMN 患者蛋白尿水平无法回复正常的风险预测因素 (Hoxha, Thiele et al. 2014)。
(4)病情预测:抗 PLA2R 抗体滴度越高,疾病的自发缓解率越低;肾功能衰竭风险及非肾病患者发生肾病综合征的风险越高;治疗时间越长 (Kanigicherla D et al, 2013 ; Hofstra JM et al, 2012 ; Hoxha E et al, 2014 ; Ruggenenti P et al, 2015; Hoxha E et al, 2014)。
(5)风险评估:40% 的 pMN 在肾移植后会再次复发 (El-Zoghby, Grande et al. 2009),当抗 PLA2R 抗体在肾移植术后 6 个月持续检出时意味着术后复发的风险特别高。因此,抗体滴度可以用于评估是否有必要接受移植术后为避免复发的免疫抑制治疗 (Seitz-Polski, Payre et al. 2014)。
如何检测抗 PLA2R 抗体
欧蒙公司的抗 PLA2R 抗体检测试剂采用独家专利技术,是全球唯一的血清学诊断试剂盒。根据不同诊疗需求,为临床提供两种方法学试剂。
间接免疫荧光法(IIFT)使用转染细胞(重组人 PLA2R 受体蛋白)和未转染细胞作为标准基质,实现高灵敏度及特异性的检测性能。酶联免疫法(ELISA)的微孔内包被重组人 PLA2R 受体蛋白,可定量检测血清或血浆中的抗 PLA2R 抗体,五点定标的 ELISA 试剂盒可以覆盖几乎所有临床样本中抗体水平,从而无需在检测时二次稀释样本。ELISA 法与 IIFT 法的阳性符合率高于 97%,阴性符合率达到 100%.
IIFT 由于方法学特性具有较高的检测灵敏度。因此,建议临床首诊病人使用 IIFT 进行筛查,确保抗体检出率,有效区分原发性、继发性 MN。ELISA 试剂用于阳性样本的定量分析,从而利于疾病活动性评估、制定治疗方案、疗效监测、病情预测等临床应用。
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