ELISA法检测幽门螺杆菌抗体的临床意义

 

ELISA法检测幽门螺杆菌抗体的临床意义

本研究用间接ELISA法检例患者和健康输血员血清中抗HpIgA、IgG同时还检测了胃粘膜中的Hp，以探讨Hp抗体测定的临床意义。

1　材料和方法

1.1　材料

　　本组217例患者经胃镜及胃粘膜组织学诊断为十二指肠球部溃疡（DU）48例， 胃溃疡 （GU）27例，慢性萎缩性胃炎（CAG）18例，慢性清表性胃炎（CSG）96例，复合性溃疡（CU）7例，胃癌（GCa）14例，胃粘膜正常2例。 慢性胃炎 中活动性胃炎（ACG）54例，非活动性（NACG）60例。所有患者均抽取空腹静脉血，此外还收集了80例健康输血员血清测抗HpIgA、IgG。

1.2　方法

①胃粘膜内Hp菌检测活检粘膜直接涂片检查及Hp的分离培养鉴定均参照张振华所报道的方法。②ELISA方法：从患者胃粘膜中培养出的7株Hp菌分离纯化，超声粉碎后在4℃下1500g离心30min，取上清蛋白定量后作抗原。用50mg/ml的抗原包被聚苯乙稀反应板，用间接ELISA法测定，每板均设标准阳性和阴性对照，将两者OD值用作为质控，每板此值之差在±0.5范围内。结果用特测标本OD值与标准阳性OD值之比来表示，该比值在血清IgA≥0.6，在IgG≥0.5为阳性，在胃液IgA≥0.145为阳性。③吸收抑制试验：用7例在ELISA试验中高效价IgA、IgG的Hp感染者的血清混合后从1：10开始对倍稀释至1：160，然后分别用Hp、空肠弯曲菌（CJ）及大肠杆菌完整的细菌和Hp抗原吸收后，按上述方法做ELISA。

　　计数资料用卡方检验，计量资料用 t 检验。

2　结果

　　Hp阳性患者血清中抗HpIgA、IgG含量均显著高于Hp阴性者（ P ＜0.01）。与细菌学比较其敏感性分别为92.1％和95.7％，特异性分别为91.1％和88.5％，符合率分别为71.7％和93.2％（表1）。可以看出不同疾病之间的血清抗HpIgA和LgG含量有显著差异（ P ＜0.01），两组比较发现血清IgA含量在ACG组显著高于除CU外的其它各组（ P ＜0.05， P ＜0.01），消化性溃疡各组显著高于NACG组（ P ＜0.01），2例组织学正常者IgA、IgG分别为0.44和0.37，80例健康输血员血清抗HpIgA，IgG的含量和阳性率均显著低于ACG，GU，DU及GCa组（ P ＜0.01， P ＜0.05）。研究表明，血清Hp抗体与胃炎的严重程度有关，中重度胃炎血清抗HpIgA，IgG的阳性率为82.4％和79.0％，显著高于轻度胃炎的45.6％59.7％（ P ＜0.01， P ＜0.05）。但Hp抗体含量和阳性率在浅表性胃炎和萎缩性胃炎之间无显著差异（ P ＜0.05表2）。

表1　胃粘膜内Hp和血清Hp抗体的比较

胃粘膜Hp

n

IgA

IgG

X±S

阳性数（％）

X±S

阳性数（％）

阳性

139

0.79(0.19)

128(92.1)

0.65(0.13)

133(95.7)

阴性

78

0.50(0.1)

7(9.0)

0.45(0.13)

9(11.5)

表2　各种胃部疾病血清抗HpgA，IgG比较

病 种

n

IgA

IgG

X±S

阳性数（％）

X±S

阳性数（％）

ACG

54

0.82(0.2)

49(90.7)

0.69(0.1)

51(94.4)

NGCG

60

0.53(0.2)

22(36.7)

0.47(0.1)

23(38.3)

GU

27

0.71(0.2)

19(70.7)

0.59(0.2)

20(74.1)

DU

48

0.71(0.2)

31(64.6)

0.57(0.2)

34(70.8)

CU

7

0.86(0.4)

5(71.2)

0.58(0.1)

5(71.2)

GCa

14

0.68(0.2)

8(57.1)

0.55(0.1)

8(57.1)

RG

5

0.54(0.1)

120.0

0.52(0.2)

1(20.0)

输血员

80

0.47(0.2)

27(33.8)

0.43(0.2)

25(31.3)

　　Hp阳性患者胃液中抗HpIgA显著高于Hp阴性者（ P ＜0.01），与细菌学结果比较敏感性，特异性与符合率分别为96.4％92.9％和95.3％（表3）。

表3　胃粘膜内Hp的检出率和胃液抗HpIgA的比较

胃粘膜

n

X±S

阳性数

阳性

57

0.438（0.234）

55（96.5）

阴性