常见病毒敏感动物的选择

 

二、常见病毒敏感动物的选择

病毒敏感动物的研究，一直是病毒学中的重要内容之一。实验动物在人类病毒学发展史上曾起过重要作用，主要用作分离病毒、研究发病机制、抗病毒药物筛选、疫苗效果及完全性鉴定、制备诊断用品等。

实验动物选择，应注意影响动物实验效果的各种因素。不同种属动物对同一致病因素的易感性不同，对一种动物是病原体，对另一动物可能并不致病。即使是同一种属动物的不同品系，对同一刺激的反应也有很大差异。年龄、体重、性别、生理状态、健康情况，往往导致对同一刺激的不同结果。此外，病毒学研究中，接种途径的改变往往导致不同的感染结果。实验中，应尽量利用经微生物控制的动物和纯种动物。

表10-51　各种病毒在鸡胚内的繁殖与接种途径

病　　毒

鸡胚

日龄（天）

接种途径

培养

温度（℃）

培养时间

繁　殖

收　　获 流行性感冒 9～12 尿囊腔、羊膜腔 33～35 36～48小时 血　　凝 尿囊液、羊水 流行性腮腺炎 9～12 ″　　″ 35 5～7天 血　　凝 ″　″ 新城疫 9～12 绒毛尿囊膜、羊膜腔 32 4天 死亡血凝 ″绒毛尿囊膜 水　　痘 10～13 绒毛尿囊膜 37 2～3天 痘　　疱 绒毛尿囊膜 痘　　苗 10～12 ″ 37 2～3天 痘疱死亡 ″ 天　　花 10～12 ″ 37 3天 ″　　″ ″ 单纯疱疹 10～13 ″ 37 2～6天 ″ ″ 带状疱疹 10～13 ″ 37 2～5天 ″　　″ ″ 乙型脑炎 6～8 卵黄囊、绒毛尿囊膜 37 3天 死　　亡 鸡胚、尿囊液、绒毛尿囊膜 春夏型脑炎 6～8 ″　　″ 37 3～4天 ″ 卵黄囊膜 东方马脑炎 10～12 羊膜腔、尿囊腔 37 18小时 死　　亡 尿囊液、羊水、绒毛尿囊膜 淋巴球性

脉络丛脑膜炎 6～8 绒毛尿囊膜 37 3天 ″ 绒毛尿囊膜 狂犬病 7～9 ″　羊膜腔 37 4～6天 血　　凝 ″、羊水 劳斯肉瘤 9～11 ″ 37 5～10天 痘　　疱 绒毛尿囊膜 鸡传染性支气 5～6 卵黄囊 37 3～4天 死亡或异常 卵黄囊 管　　炎 9～11 绒毛尿囊膜 37 3～7天 ″　　″ 尿囊液、绒毛尿囊膜

（一）RNA病毒敏感动物

1．披盖病毒科

⑴黄热病毒：黄热病毒是披盖病毒科、黄热病毒属（B组虫媒病毒）的原型。所有灵长类可能都易感，其中非洲种类抵抗力较高，只有隐性感染或很轻的非致死症状，而南美及西印度群岛的猴敏感得多。最为敏感的动物是恒河猴，另外可用中国猴（Macacus Sinicus）及断尾猴（M.Speciosus Thibetanus）。小白鼠对黄热病毒也敏感，令人感兴趣的是：纯血清接种的小白鼠尚能很好存活，而以稀释血清接种的小白鼠却于较短时期内死亡。这一奇特现象的理由，可能是由于病人体内血清抗体早期出现之故。应用纯血清时，这些抗体中和了病毒的作用，而当应用稀释的血清时，抗体浓度不足，但病毒在稀释后仍然具有活力。

⑵登革病毒：登革病毒属披盖病毒科中的黄病毒属，小白鼠往往是经常应用唯一实验动物。有几株病毒已对其适应，特别是对新生小白鼠。1～2日龄乳鼠和仓鼠脑内注射病毒后死亡。病毒对小白鼠的适应过程如下：接种年龄2～3周的小白鼠，最好选用abc种，一部分小白鼠接受未经稀释的血清，另一部分则接受稀释至1：100的血清，观察5～6周，杀死明显有麻痹或脑膜炎征象的小白鼠，以其脑组织制或悬液接种于其人它小白鼠。

猴对登革病毒易感，很多种猕猴，食蟹猴，长尾猿，狒狒都可因蚊虫叮刺或注射病毒而受到感染。基本是无症状的隐性感染，但接种后1～7天内有病毒血症，有人报告有轻度白细胞减少。

小鸡、晰蜴、新生或成年豚鼠、兔、仓鼠或棉鼠实验接种后不发生疾病。

个别报告称脑内或鼻腔内接种可使日本黄鼠死亡，未能被证实。

⑶乙脑病毒：乙脑病毒属于披盖病毒科黄热病毒属的B组虫蝶病毒。

实验室内，乳鼠和成年小鼠鼠脑内接种后发生致死性脑炎，腹腔内接种后乳鼠发生致死性脑炎，只有几种小鼠株的成年小鼠发生致死性脑炎。恒河猴、食蟹猴和成年仓鼠脑内接种后发生致死性脑炎，但周围途径接种时只发生无症状的病毒血症。豚鼠和兔脑内或周围接种，蝙蝠、小鸡、和苍鹭周围接种后都只发生无症状的病毒血症。蝙蝠可保持感染，经过冬眠后重新发生病毒血症。

2．沙粒病毒科

⑴胡宁（Juinin）病毒：胡宁病毒是阿根延出血热致病因子。属子沙料病毒的Tacaribe复合群。

豚鼠实验感染Junin病毒时产生类似人类阿根延出血热的致死性疾病。接种后5～8天，感染的动物开始发热，在11～15天体温过低，休克而死亡。病毒血症以及尿和唾液排出病毒一直到死。尸检时采集的主要器官中都有病毒。

乳鼠实验感染时产生典型的病毒性脑炎，死亡率为95～100%，成年小鼠有抵抗力。

⑵拉沙（Lassa）病毒：拉沙病毒属于沙粒病毒科。新生小白鼠脑内接种此病毒引起不显性持续感染。成年小鼠脑内接种后5-7天出现致死性疾病，有痉挛发作，最后后腿强直、呼吸停止。成年多乳鼠实验感染为隐性感染。松鼠猴肌肉接种后，经10-14天潜伏期，动物发生多变的致死性疾病。豚鼠腹腔内接种后，发生呼吸功能不全，约67%的动物死亡。

⑶淋巴细胞脉络丛脑膜炎（LCM）病毒：本病毒与拉沙病毒，马秋堡（Machupo）病毒同属沙粒病毒属，对小白鼠脑内接种尤为敏感，可供分离病毒用，对猴及豚鼠有致病力。

应使用4周龄的小鼠及乳鼠、未断乳豚鼠200-400g重的豚鼠。可能时，采用“瑞士”Albinos种小鼠。饲养中，应确保无LCM病毒感染。为取得最好效果，一方面接种幼年动物，另一方面用年龄较长的。接种量如下：

6-8天龄乳鼠：脑内接种0.03ml，腹腔接种0.2ml。

4周龄小鼠：脑内接种0.03ml，腹腔接种0.25ml。

未断乳的小鼠：脑内接种0.05ml，腹腔接种1ml。

已断乳的200-400g豚鼠，脑内接种0.15ml，腹腔接种5ml。

不同接种途径的感受性亦是不同的。脑内接种感染而发病的鼠数（4周龄以上的）远比经腹腔内接种者为多。经腹腔接种者可不显任何症状。豚鼠（250g以上）二种接种途径的发病数大致相等（有进脑内接种稍高些），但这些资料并不对所有毒株适用。

小白鼠感染后表现多变，可能有三种过程：⑴急性疾病并死亡；⑵急性急病，恢复并产生抗体；⑶形成持久的耐受性感染，携带病毒，不产生抗体。决定因素有：⑴感染的病毒株；⑵接种途径（最为重要）；⑶动物感染时的年龄。

产生急性疾病的动物一般在感染后4-7天出现体征。表现为：弓背、竖毛、嗜睡、眼睑炎、头部水肿等。

3．小RNA病毒科

⑴脊髓灰质炎病毒：脊髓灰质炎病毒是小核糖核酸（RNA）病毒科、肠道病毒属的一种。1908年Landsteiner和Popper成功的把此病毒传播于猴。在后来的40年里证明了亚人类灵长类能经消化道感染，有些株能适应于实验室的啮齿类。