生化标记技术

量子点是尺寸在 1-100 纳米的半导体材料（包括Ⅱ-Ⅵ族，Ⅲ-Ⅴ族，Ⅳ族等），具有明显的量子效应。与传统的有机荧光染料相比，具有灵敏度高，稳定性好，荧光寿命长等优势。量子点的特殊的光学性质使得它在光化学、分子生物学、医药学等研究中有极大的应用前景。量子点最有前途的应用领域就是作为荧光探针应用于生物体系。在荧光标记中，经常需要用多种颜色波长的量子点对不同物质进行标记，并且在同一激发光下，可同时进行观测。这需要有一系列波长的量子点可 ...

液相芯片技术是20世纪90年代后期发展起来的被喻为后基因组时代的芯片技术。液相芯片技术将流式检测技术与芯片技术有机地结合在一起，一方面大大延伸了流式检测平台，以微球体代替细胞作为反应载体，这个相当开放的反应体系可进行蛋白、核酸等等生物大分子的检测，不仅从细胞水平深入到分子水平，其检测范围也得到了前所未有的扩展；另一方面也使芯片技术取得重大的突破：在保持高通量检测的同时，将反应体系由液相－固相反应 ...

SDS-PAGE电泳后的蛋白质固定、染色以及脱色过程均要用到高浓度的有毒且易燃的有机溶剂（甲醇、乙醇或2-丙醇）以及醋酸，我们将介绍一种通过改变染色溶液的组分而无需有机溶剂和醋酸的染色方法。

视频详细介绍了人类精子荧光原位杂交的过程，如人类精液标本的固定，精子染色质的解浓缩和变性，精子的荧光原位杂交，以及如何在显微镜下可视化实验结果。

量子点具有传统荧光染料和镧系配合物无法比拟的荧光特性：宽的激发光谱、窄的发射光谱、更长的寿命等。本文概述了量子点的光学特性和制备方法，并着重介绍了其作为荧光标记物在生物学中的应用。

问：现在有没有比较好的方法标记内毒素LPS的，或直接标记好的？ 答：可以用FITC标记的，附件是文献。 ...

（1）10 ×缺口平移缓冲液：200mmol/l Tris-HCl，pH7.4含50mmol/L MgCl2；100mmol/Lβ-巯基乙醇、1mg/ml BSA。　　（2）缺口平移反应终止液：200mmol/L NaCl；10mmol/l Tris-HCl，pH7.4；11mmol/L EDTA； 0.5% SDS。　　（3）DNaseⅠ:干粉状DNaseⅠ(2000～30 ...

1．标记DNA探针 每次标准的反应可标记10ng至3线性的DNA，也可标记更大量的DNA，但所有的成分和体积要相应增加。 （1）DNA探针热变性，煮沸10min，迅速冷却于冰/乙醇中5min以上，待用。 （2）取Eppendorf管（1.5ml）置于冰上，加下列及试剂： 新鲜变性的DNA 1-3 六聚核苷酸混合物 2（管5） dNTP标记用混合底物 2（管6） 加无菌重蒸水至 19 D ...

非放射性物质标记核酸探针的方法通常是通过在核酸分子中引入诸如半抗原、生物素等惰性小分子。这些小分子一般通过连接到dUTP等核苷三磷酸上。这种经修饰的核苷三磷酸再通过酶促反应掺入到探针中，例如用于随机引物法标记长链探针或是通过末端转移酶标记寡核苷酸的3′端。 杂交后用与一种酶相连接的抗体（或者如果是生物素，则用链霉抗生物素蛋白streptavidin）来检测，这些酶如碱性磷酸酶或辣根过氧 ...

问：有没有做辣根过氧化物标记的朋友啊，能不能把你们的步骤发给我。本人开始做，发现很多人用的浓度都不一样。 答：1.1 试剂准备 1) 10mg/mL HRP 2) 0.06mol/L NaIO4 3) 0.16mol/L乙二醇 4) 碳酸盐缓冲液(Na2CO3 0.7952g NaHCO3 1.4702g 溶于500mL蒸馏水中，调pH值到9.5) 5) 2.5mg/mL NaBH4 6) 0.0 ...

问：我想知道，用什么方法进行酶标记可以非常有效呐？过碘酸钠标记怎么样？ 答：第一节 间接法测抗体 基本原理 将特异性抗原包被在固相载体上，形成固相抗原，加入待检标本（含相应抗体），其中抗体与固相抗原形成抗原-抗体复合物，再加入酶标记的抗抗体（抗人免疫球蛋白抗体，亦称二抗），与上述抗原-抗体复合物结合。此时加入底物，复合物上的酶则催化底物而显色（反应过程见图1－1）。 试剂与设备 纯化抗原。 ...

当FITC在碱性溶液中与抗体蛋白反应时，主要是蛋白质上赖氨酸的r氨基与荧光素的硫碳胺键(thiocarbmide)结合，形成FITC-蛋白质结合物，即荧光抗体或荧光结合物。一个IgG分子中有86个赖氨酸残基，一般最多能结合15～20个，一个IgG分子可结合2～8个分子的FITC，其反应式如下 FITC-N=C=S + N-H2-蛋白质 → ...

摘要 分子信标技术是一种基于荧光共振能量转移现象（FRET）和碱基互补配对原则建立起来的一种分析技术。分子信标作为一种荧光标记的分子探针，具有极强的特异性和较高的灵敏度，目前已经成为基础医学和生物学的重要研究工具。本文着重介绍了分子信标的基本原理及其应用，并对其近年来的研究进展做以简单介绍。 1 引言 在基因时代和蛋白质时代，人们迫切需要一种具有高灵敏度和高亲和力的生物分子探针，用以进行定性和定量 ...

1996年Tyagi和Kramer首次建立了分子信标探针，最初目的是能在液相中定量测定靶标的量。分子信标技术以其操作简单、灵敏度高、特异性强、可对核酸进行实时定量测定、甚至可以用于活体分析等特点不仅在生物学研究中有着广泛的应用，而且在疾病基因检测与诊断等生物医学基础和临床研究中也将充当重要的角色。近来，人们通过改变经典分子信标的结构，设计出许多新型的分子信标，如用ssDNA链做环、用RNA-DNA ...

Tyagi和Krammer于1996年设计了一种可以特异性识别核酸序列的新型荧光探针这种荧光探针通过与核酸靶分子进行杂交后发生构象的变化而发出荧光他们将其命名为分子信标(Molecular Beacon)。 分子信标具有背景信号低灵敏度高、特异识别性强、操作简单，不必与未反应的探针分离即可实时检测，可用于活体分析等优点。在生物化学分析，生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用价值。 分子信标的结构 ...

探针标记方法有： 1、DNA的缺口平移法。缺口平移是一种快速、简便、成本相对较低以及生产高比活性均一标记DNA的方法。该技术可以制备序列特异的探针。当使用重组质粒探针时，虽然任何形式的双链DNA都可以进行缺口平移标记。但通常使用限制性核酸内切酶将插入片段进行酶切和凝胶电泳纯化后再进行缺口平移标记。此外，用这种探针进行杂交可产生较低的背景信号。 2、DNA的随机引物法。这种方法是使用寡核苷酸引物和大 ...

一、背景 近几年来，申报的合成多肽类新药越来越多，如依降钙素、丙氨瑞林、胸腺五肽、胸腺素α1、奥曲肽、生长抑素等品种。这类新药与普通的化学药品在合成、结构确证及质量标准等方面的要求均不完全相同，并且我们的药学审评人员均未从事过这方面的研究工作。以前对于此类品种的审评，都是通过专家审评会的形式进行。但是随着此类品种的增多，以及逐步向"内审"过渡的战略转移，这种模式已很 ...