抗体抗原实验

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相关专题 &NBSp; 1、4%多聚甲醛常规灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液(4℃)过夜，蜡块制作，切片，贴片。0.01M PBS清洗5min×3次; 2、脱蜡、水化：用二甲苯两次10min，用梯度乙醇由低浓度到高浓度进行水化; 3、加入0.3%的过氧化氢甲醇溶液(甲醇80ml+0.01M PBS 100ml+30%过氧化氢)30min，以 ...

相关专题 德国美天妮公司的MACS技术已成为细胞分选实验中不可绕开的实验方法，MACS技术几乎可在每一个细胞实验室中占据一席之地。那么，了解美天妮公司的MACS技术的技术原理和优点，及其分选策略该从哪方面入手呢? MACS技术已成为细胞分选的标准方法，从小规模到大规模，从常见细胞到稀有细胞和复杂的细胞亚群，从人类和小鼠细胞到其它种系的细胞， ...

相关专题 1966年，Nakane等人首次用酶代替标记抗体，之后Sternbenger等成功引入非标记抗体，使得免疫酶法得到长足的发展，并成为应用最广泛的免疫组化技术。下面将介绍免疫酶法的优点以及实验方法等内容。 免疫酶法是借助酶细胞化学等手段显示组织抗原(或抗体)的新技术，是在免疫荧光法的基础上发展起来的。免疫酶法的基本原理与免疫荧光法有 ...

相关专题 MTT分析法以活细胞代谢物还原剂3-(4，5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3，5-di- phenytetrazoliumromide， MTT噻唑蓝为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下tetrazolium环开裂，生成蓝色 ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 用于福尔马林固定的石蜡包埋组织切片：1)抗原热修复 可根据实验室的具体条件，选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原修复。抗原热修复可选用各种缓冲液，如TBS、PBS、重金属盐溶液等，但实验证明，以0.01M枸橼酸盐缓冲液(pH6.0)效果最好。请选用我公司提供的ZLI-9064 枸橼酸盐缓冲液(粉剂 ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 (一)为什么要进行抗原修复? 组织在制作过程中，由于化学试剂的作用封闭了抗原，又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲，致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来，为了解决上述的问题，利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。 在免疫组化染色后的镜下观察中，有发现这样的结果，阳 ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 抗体 1. 抗体的结构 抗体是能与抗原特异性结合的免疫球蛋白 (immunoglobulinIg)。Ig 分五类，即IgG、IgA 、IgM、IgD 和IgE。与免疫测定有关的Ig 主要为 IgG 和IgM。Ig 由两个轻链(L)和两个重链(H)的单体组成。Ig 的轻链是相同的，有κ(kappa) ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 (一)原理 当抗原遇到相应的抗体便形成抗原抗体复合物(Ag+Ab ↔Ag -Ab)，当用放射性同位素标记抗原再与相应的抗体结合便形成标记抗原和抗体复合物。即： Ag~DAb↔ Ag~FAb。 当标记抗原和未标记抗原一起加入相应的抗体时则两种抗原产生相互的竞争，而生成有标记抗原和抗体复合物以 ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 抗体是机体接受抗原刺激后产生的一种具有免疫特异性的球蛋白。在免疫学实践，为制备抗体常以抗原性物质(细菌、病毒、类毒素、血清及其他蛋白质)给动物注射。经过一定时间后，动物血清中可以产生大量的特异性抗体。这种含有特异性抗体的血清称为免疫血清。免疫血清不但对传染病的诊断、预防和治疗有重要意义，而且对器官移植，肿瘤以 ...

相关专题 抗原实验技术及研究进展 【原理】 双向扩散法是指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散而形成一定类型沉淀线的方法。沉淀线的特征与位置不仅取决于抗原抗体的特异性及相互间浓度比例，而且与其分子大小及扩散速度相关。当抗原抗体存在多种系统时，可呈现多条沉淀线以至交叉反应。 【材料】 生理盐水1%琼脂管(每管约4ml) 载玻片 打孔器及打孔 ...

相关专题 绿色荧光蛋白（GFP）是从水母中分离得出，作为分子生物学常用的荧光标记，可以实现活细胞内基因表达和定位，对细胞无毒害作用，细胞内的GFP检测比较简单（可利用荧光显微镜等检测），GFP在细胞生物学上具有广泛的应用前景。 免疫印迹(Western blotting 或 Immunoblotting)一般由凝胶电泳、样品的印迹和免疫学 ...

相关专题 免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。主要是利用荧光标记的抗体与待测抗原间反应进行抗原或者半抗原物质定位的技术。本文总结了免疫荧光技术常见的问题及解析。 1、问：近期要做免疫荧光双标，不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项? 参考见解： ...

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相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） CTL 提供唯一由实验室开发并精制的 ELISPOT 系统。 目前已经发展到第三代，称为Seriese 3系列。 根据客户的不同分析需要以及预算， CTL 设计了两种类型的分析仪，包括 Analyzer 和 ImmunoScan 两种产品。两者成像方式有所区别，分析软件均一样。为了提高 ELISPO ...

相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） 图注：ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。将指定数目的能产生IFN- 的T细胞与一百万个抗原呈现细胞（Antigen Presenting Cells，APC）混合后，使用ELISPOT 法（上图）、胞质内染法（中图）和ELISA 法（下图）分别测量产生IFN- ...

相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） 为了实现ELISPOT的标准化，显色最好在恒温箱内进行，温度控制在25°C±5°C，显色25分钟为宜。另外，在37°C显色也是不错的一个方法，但要注意相应的缩短显色时间到12-18分钟，并且显色中勤检查。为了提高ELISPOT检测结果的可重复性，增加实验的可信度，必须建立一套标准化的实验操作规范。标 ...

相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） &NBSp; 一、简介ELISPOT技术 ELISPOT全名为Enzyme-linked Immunospot Assay，其技术原理与ELISA相似。其实验设计是在96微孔培养盘底部披覆PVDF薄膜，用来吸附特殊挑选、且无毒性(不含sodium azide、内毒素endotoxin)的单株抗体。静 ...

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相关专题 酶联免疫斑点法（ELISpot） ELISPOT基本操作过程： 一、包被96孔板： 用70％乙醇浸润96孔板中的PVDF膜30s 加入捕获抗体（PBS稀释），4℃过夜 倒空板中包被液，轻轻在纸上拍干，用PBS洗涤，禁用洗板机 加入100ul 2%的脱脂奶粉（或者BSA）室温孵育2小时，封闭板中空白位点 PBS洗涤1次。 （如果暂时不 ...