生物化学技术

相关专题 人类基因组计划与美国塞莱拉遗传信息公司于 2001 年在美国《科学》杂志和英国《自然》杂志联合宣布，他们绘制出了准确、清晰、完整的人类基因组图谱，至此，人类基因组计划已基本完成，随着后基因组时代的到来，蛋白质组学得到了空前的发展，蛋白质组研究旨在揭示基因表达的真正执行生命活动的全部蛋白质的表达规律和生物功能。包括蛋白质组、蛋 ...

相关专题 1. 缓冲系统：在没有离子存在时，电导率最小，DNA不迁移，或迁移极慢，在高离子强度的缓冲液中，电导很高并产热，可能导致DNA变性，因此应注意缓冲液的使用是否正确。长时间高压电泳时，常更新缓冲液或在两槽间进行缓冲液的循环是可取的。 2. 琼脂糖：不同厂家、不同批号的琼脂糖，其杂质含量不同，影响DNA的迁移及荧光背景的强 ...

相关专题 学习和掌握限制性内切酶的特性、酶解和琼脂糖凝胶电泳的操作方法，理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具，琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定DNA片段的有效方法。 限制性核酸内切酶： 是一类能识别双链DNA分子特异性核酸序列的DNA水解酶。是体外剪切基因片段的重要工具，所以常常与核酸聚合酶、连接酶以及末端修饰酶等一起称为 ...

相关专题 一、原理 在纸层析中，通常支持相是含水的，移动相是有机溶剂.但是脂肪酸（fattyacid）等化合物宜用有机溶剂为支持相和以含水溶剂为移动相，这样能更好地进行分配，也就是所谓“反相纸层析法”。由于不同的脂肪酸在两相中分配系数不同，所以在层析滤纸上移动速率就有差异，这样就使混合脂肪酸各组分被分开。然后用醋酸铜处理，将脂 ...

相关专题 凡能催化同一种化学反应，但其分子结构和带电性质不同的一组酶称同工酶（isoenzyme）。同工酶谱的差异是基因表达的差异造成的，所以在研究植物基因调控与生长发育及其与环境条件的关系以及许多生理生化和遗传问题时，常常要分析同工酶谱的差异。因此，同工酶研究在理论和实践中都有非常重要的意义。 一、原理 聚丙烯酰胺凝胶由 ...

相关专题 乙烯（ethylene）是植物内源激素之一。以气体形式存在。准确测定乙烯释放量，对认识乙烯在植物抗逆生理、发育生理、开花生理中的作用有着重要的意义。 一、 原理：气相色谱具有灵敏度高，稳定性好等优点。色谱仪中的分离系统包括固定相和流动相。由于固定相和流动相对各种物质的吸附或溶解能力不同，因此各种物持的分配系数（或吸附能 ...

相关专题 一、原理 用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离鉴定蛋白质（protein），主要依赖于电荷效应和分子筛效应。再与标准样品对照即可确定各区带的成分。要利用凝胶电泳测定某样品的蛋白质分子量就必须去掉其电荷效应，使样品的蛋白质分子的迁移率完全取决于分子量。如在电泳体系中加入一定浓度的十二烷基硫酸钠（Sodiumdodecylsulfa ...

相关专题 一、原理 DNA在碱性的溶液中带有负电荷，因此，在电场作用下朝正极移动。在琼脂糖凝胶中电泳时，由于琼脂糖凝胶具有一定孔径，长度不同的DNA分子由于所受凝胶的阻遏作用大小不一，迁移的速度不同，从而可以按照分子量大小得到有效分离。溴化乙锭可插入到DNA分子的双链中。在紫外光的照射下，插入溴化乙锭的DNA呈橙红色荧光，所以溴 ...

相关专题 一、原理 核酸（ribonucleicacid，RNA）分子在一定pH值的缓冲液中带有电荷，将其放入电场中，可向与其所带电荷电性相反的电极移动。聚丙烯酰胺凝胶具有分子筛效应，核酸分子大小、形状不同，故在电场作用下，核酸分子在聚丙烯酰胺凝胶中泳动速度不同，依此可达到分离纯化的目的。 二、材料、仪器设备及试剂 ...

相关专题 据《生活科学》，将活的生物体和机器融为一体一直是科学家们的梦想，现在，欧洲的研究人员已经研制出一种“神经芯片”，在这种芯片上，活的脑细胞和硅电路可以有机地连在一起。　　这项研究可能有助于将来某一天开发出先进的神经修复技术，用于治疗神经失调或开发通过活的神经细胞处理数据的有机电脑。为研制出这样的神经芯片，研究人员在1平方毫米大小的硅片 ...

相关专题 一、 试剂与材料：1、 琼脂糖2、 电泳缓冲液（1×TAE）3、 10mg/ml溴化乙锭4、 上样缓冲液5、 电泳仪和水平电泳漕6、 透射紫外灯7、 胶带纸二、 操作方法按1～2%的琼脂糖浓度（据DNA样品分子量不同而定）配胶100ml↓置于微波炉内加热搅拌，至琼脂糖完全溶解↓温度降至大约50℃时（勿忘记加入溴化乙 ...

相关专题 免疫电泳（ immunoelectrophoresis ）是将电泳和琼脂扩散结合起来，用于分析抗原组成的一种定型方法，具有灵敏快速的优点。该实验可分为如下两个步骤（图 6-1 ）： 　1. 电泳 将待检的可溶性物质在琼脂板上进行电泳分离。由于各种可溶性蛋白分子的大小、质量与所带电荷不同，在电场的作用下，其带电分子的运动速度具有一定的 ...

相关专题 【目的】：掌握BCA法测定蛋白质浓度的原理。【原理】： BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂，混合一起即成为苹果绿，即BCA工作试剂。在碱性条件下，BCA与蛋白质结合时，蛋白质将Cu2+还原为Cu+，一个Cu+螯合二个BCA分子，工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物，最大光吸 ...

相关专题 色谱法，又称层析法。根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等方法。吸附色谱是利用吸附剂对被分离物质的吸附能力不同，用溶剂或气体洗脱，以使组分分离。常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、聚酰胺等有吸附活性的物质。分配色谱是利用溶液中被分离物质在两相中分配系数不同，以使组分分离。其中一相为液体，涂布或使之键合在固体载体上，称 ...

相关专题 1.吸附剂的选择及处理　　吸附剂分为无机吸附剂如硅胶、氧化铝、活性炭、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙，有机吸附剂如纤维素、淀粉、蔗糖、聚酰胺等。一般来说，所选择吸附剂应有较大的比表面积和足够的吸附能力：对欲分离的不同物质应有不同的吸附能力，即有足够的分辨力；与洗脱剂、溶剂及样品组分不会发生化学反应；吸附剂颗粒均匀。 吸附剂一般先经过筛获得均 ...

相关专题 高效液相色谱仪操作步骤：　 1)过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。 2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。 3)打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。 4)进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。 5)有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和 ...

相关专题 诊状可能的原因解决方法 (一)保留时间变化 1.柱温变化柱恒温，必要时需配置恒温箱 2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 3.缓冲液容量不够用》25mmol/L的缓冲液 4.柱污染每天冲洗柱 5.柱内条件变化稳定进样条件调节流动相 6.柱快达到寿命采用保护柱 (二)保留时间缩短 1.流速增加检查泵重新设定流速 ...

相关专题 薄层色谱是化学的一种分离和分析方法(1)、定性鉴别 化学上经典的定性鉴别例如经典的有机定性分析或经典的毒物分析，是利用各种化合物的溶解度不同和所含功能基的不同用溶剂提取或用试剂处理把它们分组或分为单一组分然后作试管反应或点滴反应(颜色反应)或根据它们衍生物的理化性质进行定性鉴别.这种方法的缺点是样品用量叫大，分离手续麻烦分析时间 ...

相关专题 依据：《中华人民共和国药典》2000年版二部。 内容： 1.简述：薄层色谱法，是将适宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均匀薄层。等点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比，用以进行药品的鉴别，杂质检查或含量测定的方法。 2 .仪器与材料： 2.1 玻板：除另有规定外，用5cm×20cm，10cm×2 ...

相关专题 （一）原理 抗原在含有抗体的凝胶中进行电泳，在电场作用下，抗原向一个方向移动，在移动的过程中，逐步与凝胶中的抗体结合而沉淀呈火箭状。沉淀峰面积越大，说明抗原量越多，二者呈正相关，因此可用于抗原的定量测定。此法具有敏感性高、快速等优点。（二）材料与试剂1．0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液配成2％的琼脂。2．抗原与抗体3 ...