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变性梯度凝胶电泳(DGGE)实验操作技术方法与步骤

相关专题 变性梯度凝胶电泳主要分离原理是利用DNA链的熔解性质达到分离目的,低熔点和高熔点的DNA局部解链的程度不同,分子的迁移速率不通过,进而分离。 一、实验原理 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm) ...

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国内电泳技术水平的现状与展望

相关专题 本文讲述了国内电泳技术水平与国外电泳技术水平的差距以及讲述了国内电泳技术提高的展望及前景。 电泳仪 中国在电泳技术临床应用上与国外相比,存在一定的差距。若按照国外实验室标准,国内三级甲等、三级乙等医院均需配备自动电泳仪,但目前国内不少三级甲等医院仍没有使用这类设备。电泳项目国内一般也只以血清蛋白为主,而国外所做项目包括血清蛋白、 ...

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琼脂糖凝胶电泳检测DNA实验的内容

相关专题 本文介绍了琼脂糖凝胶电泳检测DNA的设备、材料以及详细的实验步骤,也讲述了琼脂凝胶的特性供广大读者参考。 琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应,DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷,在电场中向正极移动。由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质,相同数量的双链DN ...

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毛细管电泳的介绍及基本原理

相关专题 本文介绍了毛细管电泳的兴起与发展、毛细管电泳基本原理。毛细管电泳于1981年由Jorgenson等人创立至今已发展达到国际先进水平。 毛细管电泳仪 一、 毛细管电泳的兴起与发展 毛细管电泳(capillary electrophoresis CE),又称高效毛细管电泳(HPCE)是近年来发展最快的分析化学研究领域之一.1981年 ...

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聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)技术催化剂的介绍

相关专题 本文讲述了聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)技术的一些催化剂的具体介绍以及聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)技术的注意事项。 聚丙烯酰凝胶电泳(PAGE)是根据被分离物质所带来的电的荷多少及其分 子大小、形状的不同,在电场的作用下,产生不同的移动速度而分离的方法。 它具有电泳和分子筛的双重作用。 1、聚丙烯酰胺的聚合丙烯酰胺单体和交联剂N1 ...

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血清蛋白质电泳技术介绍及基本操作

相关专题 本文介绍了血清蛋白质电泳技术的基本原理、实验的试剂仪器和操作过程以及影响电泳结果的主要因素,还就讲述血清蛋白质电泳技术的临床意义了供广大读者参考。 血清蛋白质电泳仪 【 实验原理】 1. 电泳的基本原理 带电颗粒在电场中向着与其电性相反方向移动的现象称为电泳。 电泳时不同的带电粒子在同一电场中泳动速度不同。带电颗粒 ( 球形分子 ...

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蛋白质组学实验指南(Molecular Biologist Guide to Proteom

相关专题 全文下载:http://www.ebioe.com/down/html/down_276.htmPaul R. Graves1 and Timothy A. J. Haystead1undefined Department of Pharmacology and Cancer Biology Duke University11 and Seren ...

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蛋白质鉴定试剂双缩脲的特点及其与Fehling's溶液的不同

相关专题 双缩脲试剂主要用于蛋白鉴定的试剂。其组成成分虽与菲林试剂相同,但两者的方法和原理却是大有不同。本文主要是介绍蛋白鉴定的常用试剂双缩脲的基本情况,以及其与菲林试剂的区别。 双缩脲试剂(biuret reagent)是由双缩脲试剂A(NaOH)和双缩脲试剂B(CuSO4)两种试剂组成. 双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 ...

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经典Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量

相关专题 一、 实验目的 1、 了解测定蛋白质的常用方法 2、 掌握蛋白质含量测定的经典Lowry – Folin法。 二、 实验原理 在碱性溶液中,蛋白质中的肽键与铜盐可产生双缩脲反应,产生络合物,此络合物会将磷钼酸-磷钨酸试剂还原,产生深蓝色复合物。在一定的条件下,蓝色深浅与蛋白质的量成正比。在波长540nm处测定样品的吸光度,与标准曲 ...

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紫外吸收法

相关专题 蛋白质分子中,酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处,其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外,蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下,蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系,可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速,不消耗 ...

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蛋白质非共价复合物的电喷雾质谱(ESI

相关专题 1.引言 细胞功能通常是由生物分子之间的弱相互作用即非共价作用而引起的,如酶与底物、蛋白质与配体、蛋白质与蛋白质及抗原抗体反应。对这些弱相互作用的影响会导致疾病的发生。如ras-GDP(蛋白质-配体),γ-干扰素(蛋白质-蛋白质同源二聚体),FKBP-rapamycin(蛋白质-抑制剂复合物)。生物学家们对这些作用正进行广泛的研究以 ...

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Double

相关专题 Protein表达是一个非常复杂的过程,因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件,在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因: 纯化全长的蛋白 获得最高纯化的蛋白 适合变性或生理条件下纯化 优化的操作过程,可以直接从培养基 ...

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GST融合蛋白的准备 Preparation of Glutathione

相关专题 Margret B. Einarson and Elena N. Pugacheva Foxx Chase Cancer Center Philadelphia PA 19111Jason R. Orlinck Brigham & Women"s Hospital Boston MA 02115Excerpted from Prot ...

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蛋白质组学实验指南(Molecular Biologist Guide to Proteom

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Folin

相关专题 一、 目的掌握Folin-酚法测定蛋白质含量的原理和方法,熟悉分光光度计的操作。二、原理Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将磷钼酸-磷钨酸试剂(Folin 试剂)还原,产生深蓝色(磷钼蓝和磷钨蓝混合物),颜色深浅与蛋白质含量成正比。此法操作简便,灵敏度比双缩脲 ...

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Western Blot Analysis by SDS

相关专题 MaterialsReady Gel Precast GelsBio-Rad Mini-Protean-3 Cell apparatusPrestained protein markers Reagents6x Laemmli reducing sample buffer Distilled H20 (dH20)Running bu ...

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小鼠β

相关专题 动物组织RNA的提取 实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙 ...

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各种大规模蛋白质相互作用研究方法分析

相关专题 关 薇 王 建 贺福初_(军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京 100850) 摘 要:随着2000 年酵母大规模蛋白质相互作用网络图谱的成功描绘,蛋白质相互作用特别是大规模蛋白质相互作用研究成为生命科学领域的又一个研究热点。酵母、果蝇、线虫以及人类蛋白的大规模相互作用图谱的相继完成,不仅对系统研究细胞内各种生命活动有着重要 ...

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新技术在研究细胞分裂中的蛋白分离中的应用

相关专题 &NBSp; 染色体分离是细胞分裂过程中的关键步骤,近期一个由奥地利、德国等组成的国际科研小组运用RNAi技术、蛋白定位等技术对近百种之前未被全面认识的人类蛋白复合物进行了全面的分析,相关研究成果发表在science杂志上。 近年来,利用酵母等真核模式生物突变体,研究人员克隆了一些调控细胞分裂早期姊妹染色体黏着和后期黏着素酶解的关 ...

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常用抗体的应用范围及选用方案

相关专题 在临床活检工作中,对于各种肿瘤的正确判断,历来是外科病理学的核心问题。因它关系到患者的治疗和预后的问题。在免疫组化技术没开展以前,主要靠HE,特殊染色和组织化学来进行鉴别和诊断各种肿瘤,这些在当时虽然解决了不少的问题,但是对于较为复杂,较为多型性的肿瘤,就不能对其起源及所含的成分作出正确的判断。 随着免疫组化工作的开展,给许多以往 ...

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