小鼠性情较温顺，一般不会咬人，比较容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定，如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作，如进行解剖实验则必须先行无

短串联重复序列 (short tandem repeats, STR) 的 PCR，也称微卫星 DNA (microsatellites) 或简单重复序列 (simple sequence repeats, SSR) 的 PCR，它的重复序列很小，其核心序列只有 2〜6bp ，重复次数通常为 15〜30 次。STR 广泛存在于真核生物基因组的编码区和非编码区中，其中以 dA-dC、 dA-dA-d

小卫星可变重复序列 PCR，1 号染色体长臂（lq42〜43）的小卫星 MS32 即 D1S8 位点的等位基因内部含有碱基数目相同但序列不同的两种重复单位，其差别在于重复序列 3'端第二个碱基 G 突变为碱基 A，导致产生或消除 HaeⅢ的酶切位点，利用 PCR 技术分别扩增这两种重复单位，电泳分离并用数字编码其排列图谱，从而获得数字化的遗传信息，该方法被称作数字编码的小卫星可变重复序列 PCR。

植物分子系统进化分析主要是利用携带植物遗传信息的生物大分子序列（比如 DNA 序列），釆用特定的数理统计算法来构建植物物种间的系统进化关系，并用一种树状分支图的形式来概括生物间的这种亲缘关系，即系统进化树。系统进化树可分为有根树和无根树，前者以外类群作为树根，后者无外类群树根。有根树的根节点为全部分类群的最近共同祖先，能够反映各分类群间的系统进化关系，而无根树仅反映出分类群间的分类关系。利用 DN

序列特异性寡核苷酸多态性 PCR，英文名是 PCR-sequence specific oligonucleotide polymorphism, PCR-SSOP。PCR-SSOP 常用于对人类白细胞抗原的 A、B、DR 进行分型，当患者需要进行骨髓或器官移植时，首先必须进行组织配型工作。如果捐受双方的遗传基因型相符合，那么受者发生「排斥反应」的概率减小，移植成功率也相对的提高。否则当双方的遗传

通过边缘群细胞表型检测和富集造血干细胞，是基于一种重要染料 Hoechst 33342 可被干细胞泵出的特征，从小鼠骨髓分离出造血干细胞。目前，通过边缘群细胞表型检测和富集造血干细胞采用流式细胞术。

细胞凋亡是调节细胞的动态平衡，流式细胞仪的多参数特性可对同一标本中数个细胞凋亡指标同时进行测定，为分析不同细胞复杂的凋亡过程提供了一个有力的工具。目前，分析细胞凋亡方法采用流式和影像细胞术。

细胞毒性淋巴细胞，是通过释放含有穿孔素和颗粒酶的颗粒和 (或) 通过 Fas-Fas 配体的相互作用杀伤靶细胞。目前，评估淋巴细胞介导的细胞毒作用的方法采用流式细胞术。

基于荧光共振能量转移的 HIV-1 病毒的融合分析是以β-内酰胺酶-Vpr 查嵌合蛋白质掺入 HIV 病毒为基础，并以其后继进入靶细胞的胞质作为融合的标志。这种融合蛋白的转移可以由酶裂解 CCF2-AM 染料的方法来监测。目前，基于荧光共振能量转移的 HIV-1 病毒的融合分析实验主要包括 3 种：含 BlaM-Vpr HIV-1 病毒粒子的制备、基于 FRET 的 HIV-1 病毒粒子的融合试验

研制重要生物活性分子的亲和性试剂是最重要的，也是生物学家面临的最具挑战性的任务。本章描述了单链抗体可变区基因片段（scFv）酵母菌表面表达文库的建立，这一方法可部分解决该问题。该方法最初由 Feldhaus 等所描述。酵母菌展示技术平台是由麻萨诸塞州技术学院 Wittrup D. 等建立的，使用 a-凝集素黏附受体显示啤酒酵母菌表面的重组蛋白质。酵母菌表面展示 scFv 抗体技术还已经被成功用于从

现在已有几种软件包用于流式细胞仪数据分析。尽管每一个在处理数据时方法各异，但是基本策略是近似的。由于随着参数的增加，分析也变得愈加复杂，因此我们集中介绍一种经典的分析手段以及可以对各种流式细胞术参数通用的分析方法。

流式细胞仪通常利用表型分析对细胞群进行分析与鉴定，或对细胞分析相关的项目进行检测，如细胞毒活性、细胞活力及凋亡等。对于利用流式细胞仪来评价或分析复杂细胞群体，如外周血中的细胞亚群是很方便的。在当前蛋白组学分析中, 二维的 SDS-PAGE 凝胶电泳和蛋白翻译后修饰的质谱分析主要是对胞内活化过程进行分析。但是，这些实验的示值读数显示的是细胞被溶解后所有细胞蛋白活化的均值，并不能对细胞群体中单细胞蛋白

虽然显微镜的使用在 17 世纪让我们认知了微生物世界的存在，但是微生物的单细胞水平的研究一直未能突破，直到 20 世纪流式细胞术的出现才得以实现。目前，用于流式细胞仪测定革兰阴性和革兰阳性细菌生理状态实验的方法主要有 2 种：DiBAC4(3)/EB/PI 染色法检测大肠埃希菌和革兰阴性菌功能和 DiOC2（3）和 TOPRO3 法检测细胞的 AW 和膜的通透性。

水势是推动水在生物体内移动的势能。水在土壤一植物一大气连续体中总是从水势较高处向水势较低处移动。在干旱、盐渍等条件下，一些植物常在细胞内主动积累溶质，以降低其渗透势。降低水势，增加吸水能力；植物体内水势的高低反映水分供求关系，即受水分胁迫的轻重。掌握小液流法测定植物组织水势的基本方法。

遗传多样性是生物在长期进化过程中形成的历史产物，是生物多样性的重要组成部分。一个物种遗传多样性的大小决定了该物种对环境变化的适应能力和进化潜力。对物种遗传多样性的研究可以揭示物种或种群的进化历史，也能为进一步分析其进化潜力和未来命运提供重要科学依据，尤其有助于物种稀有或濒危机制的探讨。近年来，各种分子标记已经被快速应用于植物遗传多样性的研究，包括限制性片段长度多态性（RFLP）、简单重复序列区间多

分子标记（molecular marker）是遗传标记（genetic marker）的一种，是在基因水平上的标记，直接在 DNA 分子上检测遗传变异，用作指示基因组范围变化的多态性标记。分子标记能对不同发育时期的个体、任何组织器官甚至细胞作检测，数量极多，遍及整个基因组，多态性高，遗传稳定，不受环境及基因表达与否的限制，正是因为这些优点，分子标记的应用越来越广泛。它包括 RFLP、RAPD、AF

针叶树是指树叶细长如针，多为常绿树，材质一般较软，有的含树脂的一类裸子植物，主要由松科的类群构成。针叶树是重要的经济森林树种，他们分布广泛，生命周期长，是生态系统的重要组成部分。松科植物的起源时间可追溯到侏罗纪甚至三叠纪，在地质时期是一个很庞大的类群，有过很多属，针叶树的大部分种类具有一种可诱导的防御系统，有化石证据表明这种防御系统至少存在了 4500 万年。针叶树具有复杂庞大的防御系统及有效的防

由于被子植物的精细胞无法运动，因此，被子植物有性生殖的完成需要借助花粉管来将精细胞传递至胚珠的胚囊中。花粉管是如何感知信号定向地向胚珠生长的呢？早期的观察发现胚囊中的助细胞含有丰富的内质网结构，暗示助细胞有活跃的蛋白质合成，由此推测，助细胞分泌的蛋白质参与了花粉管的定向生长。近年的研究表明，当用激光使助细胞猝死后，花粉管就不再向胚珠生长了。直接证实了助细胞参与诱导花粉管的定向生长。目前，助细胞表达

花粉作为植物的雄配子体，落到柱头上后，通过萌发生长出花粉管，将精细胞运至胚囊完成受精作用。花粉的萌发，以及花粉管的生长是植物有性生殖过程中的重要事件，常常将其作为研究植物细胞极性生长、分化及信号转导的重要体系。

传粉过程始于花药开裂和成熟花粉的散出，携带着雄配子或其前体的花粉粒被暴露在干燥条件下，必须在具有活力时到达适宜的接受柱头才能完成传粉过程，具有接受花粉的适宜柱头的花朵即处于柱头可授粉期。花粉保持活力的时间长短和柱头可授粉期的长短组合在一起，深刻影响着植物的传粉成功率，特别是异花传粉的植物。因此，对植物花粉活力与柱头可授性的研究，可为人工杂交育种提供重要的理论指导。