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- 详细信息
- 文献和实验
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- 保存条件:
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- 保质期:
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- 英文名:
3-Oxoisoindoline-5-carbonitrile
- 库存:
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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
1261726-80-0
- 规格:
2mg/10mg/500mg/500g
| 规格: | 2mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500g | 产品价格: | ¥100.0 |
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文献和实验培养 24 - 48 h,细胞汇合度达到 80% - 95% 左右时收取上清,该上清液即可用于提取外泌体。 使用外泌体专用无血清培养基: 待细胞汇合度~50%时,移去原有完全培养基,添加新培养基进行培养,新培养基由 50% 外泌体专用无血清培养基 + 50% 完全培养基组成; 待细胞生长汇合度约为70-80%时,移去培养基; 使用1×PBS溶液将细胞润洗2-3次; 加入外泌体专用无血清培养基继续培养24 - 48 h,待细胞汇合度到 80% - 95% 时收取细胞培养上清液,该上清液即可用于外泌
进行外泌体分离,保存会对产量有一定的影响。 注意事项: 1)细胞生长正常。换去外泌体胎牛血清(或外泌体专用无血清培养基)时的细胞密度与收培养上清时的细胞密度,一定要有显著增长,例如从 60~70% 长到 90~95%。如细胞无显著增殖生长则无需收样检测,基本没有多少外泌体分泌。也应避免细胞长得过满导致细胞凋亡,细胞凋亡可能降解外泌体; 2)及时离心处理。收集细胞上清后第一时间离心去除细胞及细胞碎片,离心后的细胞上清再放入 -80℃ 冰箱保存,避免外泌体因细胞及细胞碎片存在而导致外泌体降解
,一般取载玻片的下1/3或者下1/2一般每种组织捞5-6张,其中2-3张是备用的,每张载玻片上通常捞两份组织,做对照使用,这样形成的误差就比 较小了,而且捞载玻片的时候最好方向一致,以便观察,再将捞出来的载玻片置于架子上,放入37°C温箱中烘干。5.脱蜡:依次将载玻片放入二甲苯-二甲苯-100%酒精-100%酒精-95%酒精-90%酒精-80%酒精-70%酒精,起脱蜡作用的主要是二甲苯, 依据 的是相似相溶的原理.一般在每个试剂中放10min,天气热可以少放几分钟,相反,天气较冷的话,就要适当延长脱蜡











