Human Tie-2/Tek ELISA Kit

碧云天的Human Tie-2/Tek ELISA Kit (Human Tie-2/Tek Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人酪氨酸激酶受体Tie-2酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的Tie-2的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为118pg/ml，与人的Angiopoietin-1、Angiopoietin-2、Angiopoietin-4、小鼠mouse Tie-2/Fc Chimera、大鼠Tie-2/Fc Chimera均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。

Tie-2，又称为Tek，是一种表达在内皮细胞上的酪氨酸激酶受体，参与血管生成。Tie-2的配体主要有Ang-1, Ang-2, Ang-3和Ang-4，其中Ang-1, Ang-2, Ang-4均表达在人体内，而Ang-3则在小鼠体内表达。Tie-2基因编码产生含有1122个氨基酸分子的多肽，其中胞外域具有明显的结构特征：两个免疫球蛋白样环结构被三个EGF样重复单元所分隔，其中在第二个免疫球蛋白样环的后面还有3个纤维蛋白原III型同源体。Tie-2的胞内域含有两个酪氨酸激酶域，当其发生磷酸化时，就能够与Grb2, Grb7, Grb14, Shp2, PI3K的p85亚基和Dok-R等分子结合。若缺失胞内域C端的最后16个氨基酸，则会导致Tie-2自身磷酸化水平增加。Tie-2与其他Tie受体家族成员大约具有46%的相似性。

一些体内研究证实了Tie-2在血管生成过程中的重要性。Tie-2缺失的小鼠通常会在胚胎期第10.5天出现死亡，并且表现出重度的血管缺陷，例如头部血管的异常扩张、心肌血管复杂性降低和血管内皮细胞数量减少等。另外，Tie-2突变会使得受体活性增加6-10倍，这会导致血管畸形的发生。关于其中涉及到的具体机制，有体外研究实验表明，Ang-1与Tie-2结合后，会促使内皮细胞迁移，血管新生和存活。Ang-2作为Ang-1的竞争性抑制剂，与Tie-2结合后会导致血管内皮细胞的死亡和退化，但是当VEGF存在的情况下，Ang-2/Tie-2结合则会促进新的血管生成。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中人Tie-2/Tek的浓度，其原理见图1。人Tie-2/Tek特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人Tie-2/Tek会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗人Tie-2/Tek抗体后，生物素化抗人Tie-2/Tek抗体与人Tie-2/Tek结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。人Tie-2/Tek浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中靶蛋白浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PT897-1	人Tie-2/Tek抗体预包被板	8孔×12条
PT897-2	样品分析缓冲液	5ml
PT897-3	标准品稀释液(5X)	10ml
PT897-4	人Tie-2/Tek标准品	2-4瓶
PT897-5	人Tie-2/Tek生物素化抗体	10ml
PT897-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PT897-7	洗涤液(20X)	30ml
PT897-8	TMB溶液	10ml
PT897-9	终止液	5ml
PT897-10	封板膜(透明)	2张
PT897-11	封板膜(白色)	2张
—	说明书	1份

保存条件：

标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效，试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
更多产品简介及说明书见碧云天官网：https://www.beyotime.com/index.htm