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Mouse IL-33 ELI
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小鼠血清、血浆或细胞培养上清液
小鼠白细胞介素33酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-33的ELISA试剂盒。
双抗体夹心ELISA法
11pg/ml
96次
碧云天的Mouse IL-33 ELISA Kit (Mouse Interleukin-33 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠白细胞介素33酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的IL-33的ELISA试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为11pg/ml,与小鼠的pro-IL-33, IL-1α,IL-1β,IL-18及人IL-33具有1.7%的交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
白细胞介素-33 (Interleukin-33, IL-33),是一种分子量为30kDa的促炎性蛋白。IL-33主要表达在平滑肌细胞和气到上皮细胞中,当细胞受到炎性刺激时,IL-33的表达会出现上调。小鼠IL-33首先编码合成具有266个氨基酸的前体分子,其N端具有细胞核定位信号区域和helix-turn-helix结构,C端在结构上与IL-1家族具有一定的相似性。全长IL-33能够与核染色质相互作用,并发挥转录阻遏蛋白的作用。利用Caspase-1样蛋白酶对全长IL-33分子进行酶切,会得到分子量为18kDa的分泌型成熟IL-33分子。成熟的小鼠IL-33与人和大鼠IL-33分别具有57%和90%的氨基酸同源性,与其它IL-1家族成员具有25%的氨基酸同源性。
成熟的IL-33能够与跨膜受体ST2L/IL-1 R4结合,在IL-1 R3的协助下,完成IL-33依赖的NF-κB激活。对受体ST2L的选择性剪切会得到游离的诱骗受体ST2,ST2与IL-33的结合会封闭ST2L信号通路,抑制IL-33对免疫及心脏方面的作用效果。在哮喘和心力衰竭的患者中,ST2水平会显著升高。
分泌型IL-33分子能够促进Th2型免疫应答,导致嗜酸性粒细胞增多症和过敏反应。在Th2细胞中,IL-33能够上调IL-4、IL-5、IL-13以及ST2L的表达。在肥大细胞中,IL-33能够增强部分细胞因子和趋化因子的产生,但是并不会引发细胞脱粒。IL-33/ST2L系统对于心脏具有一定的积极作用,IL-33能够减轻由血管紧张素II或Phenylephrine造成的心肌细胞肥大,机械压力会诱导心脏成纤维细胞和心肌细胞各自产生IL-33和ST2。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中小鼠IL-33的浓度,其原理见图1。小鼠IL-33特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的小鼠IL-33会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗小鼠IL-33抗体后,生物素化抗小鼠IL-33抗体与小鼠IL-33结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。小鼠IL-33浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中靶蛋白浓度。
图1. 双抗体夹心ELISA原理图。
一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。
标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组分严禁冻存。更多产品简介及说明书见碧云天官网:https://www.beyotime.com/index.htm
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