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- 英文名:
5-Bromo-3-chlorobenzo[d]isoxazole
- 库存:
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- 供应商:
无锡云萃生物
- CAS号:
401567-43-9
- 规格:
2mg/10mg/500mg/500g
| 规格: | 2mg | 产品价格: | ¥100.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500mg | 产品价格: | ¥100.0 |
| 规格: | 500g | 产品价格: | ¥100.0 |
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文献和实验相关专题 DNA连接与转化 X-gal溶液配制方法 X-gal为5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷。用二基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的贮存液。保存于一玻璃管或聚丙烯管中,装有X-gal溶液的试管须用铝箔封裹以防因受光照而被破坏,并应贮存于-20℃。X-gal溶液无须过滤除菌。 IPTG溶液配制方法 IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238
能的β-半乳糖苷酶,该酶能把培养基中无色的X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)底物分解成半乳糖和深蓝色的5-溴-4-氯-靛蓝。然而当外源DNA 插入质粒位于α-肽编码序列中的多克隆位点时,由于破坏了α-肽的阅读框架,因而不能表达出与宿主菌基因组表达的缺陷型β-半乳糖苷酶多肽发生α-互补。由于没有β-半乳糖苷酶的酶解作用,致使重组菌形成白色菌落。由此,可以借助蓝白斑很容易筛选出重组子.不过实际操作中发现当插入小片段时,重组子也有形成浅蓝斑的情况.即蓝色菌斑也有可能含外源基因。据最新报道,大概
(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和蓝色的底物5-溴-4-靛蓝。因此,任何携带lacZ基因的质粒载体转化到β半乳糖苷酶突变的大肠杆菌细胞后,都会在涂有IPTG和X-Gal的培养基平板上形成蓝色菌落。当有外源DNA片段插入到位于lacZ中的多克隆位点后,就破坏了α肽链的阅读框,从而无法形成α互补,不能产生具有功能活性的β-半乳糖苷酶,因此含有外源DNA片段的重组子的克隆在涂有IPTG和X-Gal的培养基平板上是白色











