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- 2025年08月28日
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文献和实验。 6．调节电压为20V（小槽）或40V（大槽），电泳15min，使细胞充分裂解，将电压调高到200V，继续电泳1hr，照相。 7．根据胶图粗略鉴定插入片段的大小及小片段率。 2 ．菌落 PCR 1．取适量PCR薄壁管，置于冰上，每管先加入17.3ul的灭菌水。 2．用灭过菌的10ul小枪头挑取单克隆白斑至灭菌水中，振荡混匀。 3．依次加入： 10xbuffer 2.5
调节电压为 20V （小槽）或 40V （大槽），电泳 15min ，使细胞充分裂解，将电压调高到 200V ，继续电泳 1hr ，照相。 7 ．根据胶图粗略鉴定插入片段的大小及小片段率。 2 ．菌落 PCR 1．取适量PCR薄壁管，置于冰上，每管先加入17.3ul的灭菌水。 2．用灭过菌的10ul小枪头挑取单克隆白斑至灭菌水中， 振荡混匀。 3．依次加入
1.当PCR结果不满意时,考虑以下几个方面:(1)将PCR反应的试管与反应板紧贴,(2)使用50ul或更少反应体系时,勿使用AmpliWax,两个反应混合液=的操作方式在大多数情况下很有效,(3)当酶反应混合物以70度"热启动"开始循环时,切记在加入酶后稍微振荡一下,因为在0.2ml的PCR管不能均匀传热.(4)不要随意减少dNTP的用量,必需与其他成分保持平衡. 2.没有扩增产物:(1)在提供氯化镁缓冲液中,以0.25mmol/L为梯度增加氯化镁浓度,(2)泳道中出现模糊条带,如果DNA
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