动物总DNA/RNA提取试剂盒

动物总 DNA/RNA 提取试剂盒

动物总DNA/RNA 提取试剂盒适合于快速从动物组织、血液、分泌物、排泄物等动物样品中提取高纯度的包含病毒、细菌及寄生虫等生物的总核酸。试剂盒基于硅胶柱纯化技术， 提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提，也无需进行耗时的醇类沉淀，获得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern 杂交/Northern 杂交、以及LAMP/RT-LAMP 等系列下游实验。
 

二、原理

动物总 DNA/RNA 提取试剂盒基于硅胶柱纯化方式。样品在裂解液的作用下裂解，将核酸释放到裂解液中。核酸在高盐的环境下通过硅胶柱时将被吸附在硅胶柱的膜上，而蛋白质   则不被吸附而去除。吸附了核酸的滤膜经洗涤去除残留的蛋白质和盐，最后可以用DEPC 处理水洗脱滤膜上吸附的核酸，得到的核酸纯度高，可直接用于各种下游实验。
 

三、组成

XK0712004

组分                                含量

管 A                                48 个
管 B                                48 个
裂解液                 30 mL
洗涤液                 10 mL
洗脱液                 10 mL
                   说明书                  1 份     
注意：洗涤液在初次使用前加入 40 mL 无水乙醇，并于室温保存。



 

四、保质期

动物总DNA/RNA 提取试剂盒组份可在室温下（15-25℃）干燥保存18个月。长期保存时需置于2-8℃。
 

五、注意事项

1. 为确保检测结果准确，请严格按照说明书操作。
2. 试剂盒内管A 与管B 为一次性用品，请勿重复使用。
3. 所有用于检测的废弃物品均应放入含消毒液的废物缸内，浸泡消毒；实验结束后立  即用1% 次氯 钠或75%酒精消毒工作台。
4. 实验过程中实验人员应佩戴手套、口罩，穿着实验服，避免试剂、样品与人体接触。
5. 实验过程中应尽量避免接触A 管和离心管的管口，在进行操作步骤 1~4 时若有样品溶液粘在手套上或溅出，应立即更换手套并清洁溅出液；所有接触病料的物品均应  合理处置。
6. 本品仅供动物病原检测实验使用，请勿用于其他用途。

六、需要准备的材料和工具

50. 无菌生理盐水
50. 无水乙醇
50. 微量移液器（100-1000 μL，10-100 μL）
50. 无DNase 和RNase 的灭菌1.5 mL 离心管
50. 无DNase 和RNase 的灭菌吸头
50. 涡旋振荡器
50. 离心机（转速≥10,000rpm）
50. 以下用品请根据检测所需的样品类型选择：
    1. 血液样品：采血管及针头
    2. 组织样品：剪刀、镊子、手术刀、均质袋或研磨棒
    3. 分泌物、粪便等样品：无菌棉拭子

七、操作步骤

1. 样品制备（前处理）：
   1. 血液样品：取＞500 μL EDTA 抗凝血离心30 s，取200 μL上清液进入后续步骤。
   2. 组织样品：取0.05~1g 的组织样品，加入5~10 倍生理盐水研磨至匀浆，取 200 μL

1. 3. 分泌物、粪便样品：使用棉拭子在生理盐水中浸润后在采样部位翻转涂抹，完成采集  后将拭子头掰下放入含1 mL 生理盐水的离心管中涡旋30 s，取200 μL 混匀液进入后续步骤。
2. 取步骤1 中制备的200 μL 样品至离心管中，加入 500 μL 裂解液，颠倒混匀，静置 5 min

3. 取400 ul 上清液至新的离心管中，加入 200 μL 无水乙醇，涡旋混匀 20 s。
4. 把管 A 装在2 mL 管B 中，将步骤 3 中的混匀液全部转移至A 管中，10,000 rpm 离心1 min。
5. 倒弃管B 中的滤液，把管A 装回管B 中，加入600 μL 洗涤液至管 A 中，10,000 rpm 离心

6. 倒弃管B 中的滤液，把管A 装回管B 中，10,000 rpm 离心2 min。
7. 把管 A 装在新的离心管中。加入 50 μL洗脱液至管 A 中，静置1-2 min，10,000 rpm 离心