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- Xkbio
- XK-SJH-A773
- 国产
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
33
- 英文名：
Plant chlorophyll (chlorophyll) content kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
50管/48样
植物叶绿素（chlorophyll）含量试剂盒说明书
分光光度法 50 管/48 样注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中，其含量与光合作用、营养状况密切相关，是反应植
物生长状况的重要指标。
测定原理
叶绿素 a 和叶绿素 b 在 645nm 和 663nm 处有最大吸收，根据经验公式可计算得叶绿素 a 和叶绿素 b 以及总叶绿素含量。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、可见分光光度计、1 mL 玻璃比色皿、10mL 玻璃试管、锡箔纸、bing酮。试剂组成和配制
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存。测定操作
- 称取约新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉，称取约 0.1g，剪碎，用蒸馏水洗干净。
- 提取液的准备：取 120mL 蒸馏水和 480mL 酮，充分混匀待用。
- 加入 1mL 蒸馏水，少量试剂一（约 50mg），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入 10mL
- 用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液转入玻璃试管，用提取液定容至 10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提 3h，观察试管底部组织残渣完全变白则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至其完全变白。
- 取浸提液 1mL 于 1mL 玻璃比色皿，提取液调零，测定 663nm 和 645nm 处吸光值，分别记为 A663 和 A645 。
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计算公式
叶绿素 a 含量（mg/g 鲜重）=（12.7× A663 – 2.69 × A645）×V 提×D÷m÷1000= 0.01×（12.7× A663 – 2.69 × A645）×D÷m
叶绿素 b 含量（mg/g 鲜重）=（22.9× A645 – 4.68 × A663）×V 提×D÷m÷1000
= 0.01×（22.9× A645 – 4.68 × A663）×D÷m
叶绿素总含量（mg/g 鲜重）=（20.21× A645 +8.02 × A663）×V 提×D÷m÷1000
= 0.01×（20.21× A645 +8.02 × A663）×D÷m
V 提：提取液体积，10mL；D：稀释倍数；m：样本质量，g
注意事项
- 叶绿素对光敏感，研磨和提取等操作尽量避光或者在弱光下进行。
- 一定要浸提至组织残渣完全变白，否则提取不充分。
- 用提取液冲洗研钵一定要冲洗至所有的绿色物质被转移至玻璃试管。
- 测定时吸光值超过 1，可进行适当稀释。
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文献和实验针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
4-6)。叶绿素最强的吸收区有两处：波长640～660nm的红光部分和430～450nm的蓝紫光部分。叶绿素对橙光、黄光吸收较少，尤以对绿光的吸收最少，所以叶绿素的溶液呈绿色。 叶绿素a和叶绿素b的吸收光谱很相似，但也稍有不同：叶绿素a在红光区的吸收峰比叶绿素b的高，而蓝光区的吸收峰则比叶绿素b的低，也就是说，叶绿素b吸收短波长蓝紫光的能力比叶绿素a强。 一般阳生植物叶片的叶绿素a/b比值约为3∶1，而阴生植物的叶绿素a/b比值约为2.3∶1。叶绿素b含量的相对提高就有可能更有效地利用漫射光中较多
，这就是光密度的加和性。测定叶绿体色素混合提取液中叶绿素a、b和类胡萝卜素的含量，只需测定该提取液在三个特定波长下的光密度D，并根据叶绿素a、b及类胡萝卜素在该波长下的比吸收系数即可求出其浓度。在测定叶绿素a、b时为了排除类胡萝卜素的干扰，所用单色光的波长选择叶绿素在红光区的最大吸收峰。已知叶绿素a、b的80%丙酮提取液在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm，又知在波长663nm下，叶绿素a、b在该溶液中的比吸收系数分别为82.04和9.27，在波长645nm下分别为16.75和45.60
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