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- XK-SJH-A723
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
69
- 英文名：
Lignin Peroxidase (LiP) Test Kit
- CAS号：
无
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
2-8°C
- 规格：
100管/96样
木质素过氧化物酶（Lignin peroxidase，Lip）试剂盒说明书
微量法 100T/96S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。测定意义
木质素过氧化物酶（EC1.11.1.14）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，属于木质素降解酶系， 在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。测定原理
木质素过氧化物酶催化天青脱甲基，在 651nm 处测定吸光值减少。自备实验用品及仪器
天平、研钵、低温离心机、酶标仪、96 孔板、可调式移液器、冰。试剂组成和配制
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前加入 115mL 蒸馏水，充分溶解待用，用不完的试剂 4℃ 保存一个月。试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂三：液体 5mL×1 支，4℃保存。
酶液提取
1. 组织：按照质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1mL试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。2. 细胞：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500万细胞加入 1mL 试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，
总时间 3min）；然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体：直接检测。
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测定操作
1、酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 651nm。2、临用前按每个样本试剂一：试剂二：试剂三=80:40:40（μL）的比例配制工作液，现配现用。
3、在 96 孔板中依次加入如下试剂
| 测定管 | |
| 样品（μL） | 40 |
| 工作液（μL） | 160 |
| 充分混匀，立即测定651nm 处10s 和130s 吸光值，记为A1 和A2，△A=A1- A2 |
|
酶活计算公式
1．按照蛋白浓度计算酶活性定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟A651 变化 0.01 为一个酶活力单位。
LiP 活性（U/mg prot）= ΔA×V 反总÷（V 样×Cpr ）÷0. 01÷T = 250×ΔA÷Cpr 2．按照样本质量计算
酶活性定义：每 g 组织在每 mL 反应体系中每分钟A651 变化 0.01 为一个酶活力单位。
LiP 活性（U/g 鲜重）=ΔA×V 反总÷(W× V 样÷V 样总)÷0.01÷T = 250×ΔA÷W 3．按照细胞数量计算
LiP 活性（U/104 cell）=ΔA×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T= 0.5×ΔA 4．按照液体体积计算
酶活性定义：每 mL 血清（浆）在每 mL 反应体系中每分钟 A651 变化 0.01 为一个酶活力单
位。
LiP 活性（U/mL）=ΔA×V 反总÷V 样÷0.01÷T = 250×ΔA
V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应中样本体积，0.04mL；V 样总：加入提取液体积，
1mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；T：反应时间，2min
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文献和实验必需脂肪酸。必需脂肪酸是构成组织的组成成分，对维持细胞及亚细胞膜的功能和完整性很重要。必需脂肪酸参与类脂代谢，在调节胆固醇的代谢，特别是输送、分解和排泄方面有重要意义。亚油酸是合成前列腺素的原料。 在以植物原料为主的饲料中，一般必需脂肪酸不易缺乏，故很少另外添加。 4、碳水化合物及其营养功能 碳水化合物是由碳、氢、氧三种元素构成，包括糖、淀粉、纤维素、半纤维素、木质素等，通常在把碳水化合物分为粗纤维和可溶性碳水化合物（或称无氮浸出物）两大类。 粗纤维由纤维素、半纤维素、多缩戊糖及镶嵌物质
必需脂肪酸。必需脂肪酸是构成组织的组成成分，对维持细胞及亚细胞膜的功能和完整性很重要。必需脂肪酸参与类脂代谢，在调节胆固醇的代谢，特别是输送、分解和排泄方面有重要意义。亚油酸是合成前列腺素的原料。在以植物原料为主的饲料中，一般必需脂肪酸不易缺乏，故很少另外添加。４、碳水化合物及其营养功能 碳水化合物是由碳、氢、氧三种元素构成，包括糖、淀粉、纤维素、半纤维素、木质素等，通常在把碳水化合物分为粗纤维和可溶性碳水化合物（或称无氮浸出物）两大类。 粗纤维由纤维素、半纤维素、多缩戊糖及镶嵌物质（木质素
合成，必须由饲料供给，称为必需脂肪酸。必需脂肪酸是构成组织的组成成分，对维持细胞及亚细胞膜的功能和完整性很重要。必需脂肪酸参与类脂代谢，在调节胆固醇的代谢，特别是输送、分解和排泄方面有重要意义。亚油酸是合成前列腺素的原料。 在以植物原料为主的饲料中，一般必需脂肪酸不易缺乏，故很少另外添加。 四、碳水化合物及其营养功能 碳水化合物是由碳、氢、氧三种元素构成，包括糖、淀粉、纤维素、半纤维素、木质素等，通常在把碳水化合物分为粗纤维和可溶性碳水化合物（或称无氮浸出
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