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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20
- 保质期:
三个月
- 英文名:
Plasmid vector
- 库存:
10
- 供应商:
上海雅吉
- 规格:
质粒干粉
产品规格:质粒干粉
如需该质粒图谱质粒序列质粒属性等信息可以联系客服索取。www.yajimall.com
亲爱的科研工作者,感谢您信任雅吉生物,我们致力于为大家分享质优价适的质粒,受各种因素影响,我们只保证质粒的关键序列测序正确,不能保证实验效果。请您收到质粒后请务必先转化,再挑取单菌落扩增,不要直接使用。如果您需要即用的大包装质粒或病毒颗粒,可委托我们制备,性价比更高。
上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,科研机构、高校、院所及企业产品开发研究提供所需要的科研类试剂、耗材、仪器、技术服务等。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学,通过公司各个部门所有员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户的厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以先进的技术、优质的产品、良好的信誉,为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持、物流、售后服务等多个部门的全方位的服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户本研究所郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到,公司总投资超过2000万元,并先后引进了自动化设备,组建了专业的研发技术团队。凭借着洁净化的生产车间、标准化的质量管理系统,为生产高质量的产品提供了有效保证。雅吉生物自主研发的ELISA试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员的好评,先后在权威杂志文章中被引用。
pRRLSIN.CPPT.PGK-GFP.WPRE质粒,产品图例:

一、扩增流程
收到产品后,请先根据产品管壁标签来判断产品形式,并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒;
②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;(从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作)
③加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min;
④6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;(可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布,可以比传统涂布方法获得更多转化子)
⑤将平板正向培养1h,再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h;
(菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态,要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态)
⑥挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
2、甘油菌种(冰袋运输,存于-80℃,保质期90天,请务必划线挑单克隆培养)
四区划线后挑单菌落培养,酵母菌需要先液体复苏再四区划线,再挑单菌落液体培养。
3、穿刺菌种(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
穿刺接种,液体培养后四区划线,再挑单菌落液体培养。
4、菌落平板(冰袋运输,存于4℃,保质期7天)
直接挑取单菌落至液体培养基中。
5、液体质粒(冰袋运输,存于-20℃,保质期90天)
单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
6、滤纸质粒(常温运输,存于-20度,90天保质期,请务必转化挑单克隆培养,不要直接使用和测序)
收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中,加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min,吸取5ul质粒转化,离心全涂。
二、转化图片:

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文献和实验,而非作为基因转移载体。该慢病毒载体包含了完整的病毒基因组,仅仅是在env 基因框内插入了一个报告基因,由于存在病毒滴度较低,以及产生有复制能力的反转录病毒(RCR) 的巨大风险,这种载体从未被考虑用于基因治疗。但是,这种载体可以应用于病毒的生物学研究。2.2 第一代HIV-1 来源的慢病毒载体以Naldini以及Kafri构建的三质粒系统为代表。该载体系统由包装质粒、包膜质粒及载体质粒3 种质粒组成。载体质粒携带了5′端LTR 和全部5′端非翻译区域(包括gag 编码序列的350 个核苷
【公告】核酸技术版零应助贴整理2007.6.1-2007.6.30,请大家积极参与讨论,加分从优!
〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓 2007年零应助帖/疑难帖集合〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓 已应助帖不代表求助已经解决,鼓励战友继续积极应助,加分机会与尚未应助帖均等 不规范贴不在此次整理范围,请大家规范发贴 1.请问pcDNA3.1能作为RNAi的质粒载体使用吗? http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=9188774&sty=1&tpg=32&age=0 2.点突变没结果 http://www.dxy.cn/bbs
位的效率。31 土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件(WPRE)也会增加转录后转基因的表达。32 为了确保载体的安全性,HIV-1复制所必需的gag/pol 和rev基因由两个不同的质粒DNA表达。33 去除自身灭活载体LTRs中的病毒增强子和启动子,可以使慢病毒载体的安全性进一步提高。33 为了使其可以转导更多的细胞类型,载体中可以加入不同的包膜和细胞表面分子。其中, 疱疹性口炎蛋白G(VSV-G)有最广泛的宿主群。 34 将逆转录病毒载体直接注射到啮齿类动物体内,在多种器官可以有持久的转基因表达,包括脑
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